यहाँ हम अपने विधि माउस epidermal तंत्रिका शिखा स्टेम कोशिकाओं (महामारी NCSC) को अलग दिखा. तकनीक शामिल माइक्रो विदारक गलमुच्छा रोम, उभाड़ अलग और यह टिशू कल्चर में placeing. 4 दिन – महामारी – NCSC 3 भीतर बुनियाद पर उभाड़ explants से उत्प्रवास शुरू.
Abstract
महामारी – NCSC एक वयस्क स्थान, बालों के रोम के उभाड़ना में भ्रूण तंत्रिका शिखा के अवशेष हैं. वे multipotent स्टेम कोशिकाओं है कि शारीरिक संपत्ति है विभेदित सेल प्रकार की एक विस्तृत सरणी न्यूरॉन्स, तंत्रिका कोशिकाओं का समर्थन, चिकनी मांसपेशियों की कोशिकाओं, अस्थि / उपास्थि कोशिकाओं और melanocytes सहित उत्पन्न कर रहे हैं. महामारी – NCSC बालों त्वचा में आसानी से सुलभ हैं और स्टेम सेल के एक उच्च शुद्ध जनसंख्या के रूप में अलग किया जा सकता है. इस वीडियो गलमुच्छा रोम से माउस महामारी NCSC संस्कृतियों की तैयारी के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान करता है. एक वयस्क चूहे के गलमुच्छा पैड हटा दिया है, और गलमुच्छा रोम dissected. रोम तो उभाड़ना क्षेत्र के ऊपर और नीचे हैं longitudinally और transversely बाद में कटौती. उभाड़ना कोलेजन कैप्सूल से हटा दिया है और एक संस्कृति की थाली में रखा जाता है. महामारी – NCSC उभाड़ना explants से 3 से 4 दिनों के बाद उत्प्रवास शुरू करते हैं.
Protocol
वयस्क माउस गलमुच्छा रोम से उभाड़ के विच्छेदन हम 10 से सप्ताह से 6 महीने पुराने चूहों का उपयोग करें. युवा चूहों अक्सर अधिक कक्षों उपज. Betadine (आयोडीन समाधान) और के बारे में 3 मिनट के लिए हाइड्रोजन पेरोक्साइ?…
Discussion
उनके प्रवासी क्षमता के पुण्य से, महामारी NCSC स्टेम सेल, जो इन विट्रो में विस्तारित किया जा सकता है की एक उच्च शुद्ध जनसंख्या के रूप में अलग किया जा सकता है. एक वयस्क स्थान में भ्रूण अवशेष के रूप में, महामारी NCSC भविष?…
Acknowledgements
द्वारा समर्थित है, साउथईस्टर्न विस्कॉन्सिन बायोमेडिकल प्रौद्योगिकी एलायंस, Milwauke, WI, संयुक्त राज्य अमेरिका, Bryon Riesch पक्षाघात फाउंडेशन, Milwaukee, WI, संयुक्त राज्य अमेरिका, ईगल्स के सहोदर आदेश, मिडवेस्ट अध्याय USPHS अनुदान NS38500, मस्तिष्क संबंधी विकार के राष्ट्रीय संस्थान और स्ट्रोक, एनआईएच, संयुक्त राज्य अमरीका: , संयुक्त राज्य अमेरिका, राष्ट्रीय स्पाइनल कॉर्ड चोट एसोसिएशन, मिलवॉकी अध्याय, संयुक्त राज्य अमेरिका, पूर्वोत्तर इंग्लैंड स्टेम सेल इंस्टीट्यूट, न्यूकासल विश्वविद्यालय, ब्रिटेन.