Summary

マウス表皮神経堤幹細胞(EPI - NCSC)文化

Published: May 09, 2008
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Summary

ここでは、マウス表皮神経堤幹細胞(EPI – NCSC)を分離する手法を示す。テクニックは、膨らみを分離し、組織培養にそれをplaceing、ミクロ解剖ウィスカの卵胞を伴います。 4日間 – EPI – NCSCは、3つの内の基層の上に膨らみの外植片からの移住を開始します。

Abstract

EPI – NCSCは大人の場所、毛包のバルジの胚神経堤の名残です。彼らは神経細胞、神経支持細胞、平滑筋細胞、骨/軟骨細胞とメラノサイトを含む分化した細胞型の広い配列を生成するために生理学的性質を持つ多能性幹細胞である。 EPI – NCSCは、有毛皮膚に容易にアクセス可能であり、幹細胞の純度の高い人口として単離することができる。このビデオでは、ウィスカの卵胞からマウスEPI – NCSC培養を調製するための詳細なプロトコルを提供します。成体マウスのウィスカーパッドが削除され、ウィスカの卵胞は、解剖される。卵胞は、バルジ領域の上下に縦方向にし、続いて横方向にカットされています。膨らみは、コラーゲンのカプセルから削除され、培養プレートに配置されます。 EPI – NCSCは3〜4日後にバルジの外植片からの移住を開始します。

Protocol

成体マウスのウィスカの卵胞からバルジの解剖我々は、10週間〜6ヵ月齢のマウスを使用してください。若いマウスでは、しばしば複数のセルをもたらす。 betadine(ヨウ素溶液)と約3分間過酸化水素(薬局から入手可能)の1:1混合物中にマウスと水没全体の動物を安楽死させる。 潮吹き全体、特にマウス、顔領域、75%エタノールで、そして層流フードで解剖顕微鏡にマウ?…

Discussion

それらの回遊能力のおかげで、EPI – NCSCは、in vitroで拡張できる幹細胞の高度に純粋な人口として単離することができる。大人の場所にある胚の残党として、EPI – NCSCは、将来の細胞置換療法、生物医学工学および/または再生医療のための潜在的に魅力的な候補です。我々は、彼らが望ましい形質を示す脊髄損傷のマウスモデルでEPI – NCSCをテストしている。我々が期待どおりに、ことを示したLongSAGE(www.ncbi.nl…

Acknowledgements

、南東部ウィスコンシン州のバイオメディカルテクノロジーアライアンス、Milwauke、WI、アメリカ合衆国、バイロンリーシュ麻痺財団、ミルウォーキー、ウィスコンシン州、米国、イーグルスの友愛会、中西部章USPHS助成NS38500、神経疾患や脳卒中の国立研究所、NIH、米国後援: 、米国、国立脊髄損傷協会、ミルウォーキー章、米国、北東イングランド幹細胞研究所、ニューカッスル大学、英国。

References

  1. Sieber-Blum, M., Grim, M., YF, H. u., Szeder, V. Pluripotent neural crest stem cells in the adult hair follicle. Dev. Dyn. 231, 258-269 (2004).
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Citer Cet Article
Sieber-Blum, M., Hu, Y. Mouse Epidermal Neural Crest Stem Cell (EPI-NCSC) Cultures. J. Vis. Exp. (15), e772, doi:10.3791/772 (2008).

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