Ratón epidérmico de la cresta neural de células madre (EPI-NCSC) Culturas
Summary
Aquí mostramos nuestro método para aislar la epidermis del ratón las células nerviosas troncales de la cresta (EPI-NCSC). Técnica consiste en micro-disección de folículos bigotes, aislar el bulto y placeing que en el cultivo de tejidos. EPI-NCSC comienzan a emigrar a partir de explantes bulto en el sustrato dentro de 3 a 4 días.
Abstract
EPI-NCSC son los restos de la cresta neural embrionaria en un lugar para adultos, el bulto de los folículos pilosos. Son las células madre multipotenciales que tienen la propiedad fisiológica para generar una amplia gama de tipos de células diferenciadas, incluidas las neuronas, las células nerviosas de soporte, las células del músculo liso, el hueso / células del cartílago y los melanocitos. EPI-NCSC son fácilmente accesibles en el cuero cabelludo y puede ser aislada como una población muy pura de células madre. Este video ofrece un protocolo detallado para la preparación de ratón EPI-NCSC culturas de los folículos de los bigotes. La almohadilla de los bigotes de un ratón adulto se retira, y se diseca folículos bigotes. Los folículos son cortados longitudinalmente y transversalmente posteriormente por encima y por debajo de la región bulto. El bulto se retira de la cápsula de colágeno y se colocan en una placa de cultivo. EPI-NCSC comienzan a emigrar de los explantes bulto 3 a 4 días después.
Protocol
Discussion
En virtud de su capacidad migratoria, EPI-NCSC se puede aislar como una población de alta pureza de las células madre, que pueden ser expandidas in vitro. Como restos de embriones en un lugar para adultos, EPI-NCSC son candidatos potencialmente atractivo para el futuro de las terapias de reemplazo celular, ingeniería biomédica y / o la medicina regenerativa. Hemos probado EPI-NCSC en un modelo murino de lesión de la médula espinal, donde se muestran las características deseables. A través de perfiles de expresión génica por LongSA…
Acknowledgements
Con el apoyo de: USPHS subvención NS38500, Instituto Nacional de Trastornos Neurológicos y Apoplejía NIH, EE.UU., la Alianza de Tecnología Biomédica del Sureste de Wisconsin, Milwauke, WI, EE.UU.; Bryon Riesch Parálisis Foundation, Milwaukee, WI, EE.UU.; Fraternal Order of Eagles, Midwest capítulo , EE.UU.; Nacional de lesión medular Association, Capítulo de Milwaukee, EE.UU., el noreste de Inglaterra Instituto de Células Madre de la Universidad de Newcastle, Reino Unido.
References
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