Mus Epidermal Neural Crest Stem Cell (EPI-NCSC) kulturer
Summary
Här visar vi vår metod för att isolera mus epidermala neurala celler crest stamceller (EPI-NCSC). Tekniken innebär att mikro-dissekera morrhår folliklar, isolera bula och placeing det i vävnadskultur. EPI-NCSC börja att emigrera från bula explants på underlaget inom 3 – 4 dagar.
Abstract
EPI-NCSC är resterna av embryonala neurala krönet på en vuxen läge, bula i hårsäckarna. De är multipotenta stamceller som har fysiologiska egenskapen att generera ett brett spektrum av differentierade celltyper, inklusive nervceller, nerv stödja celler, glatta muskler, ben / celler brosk och melanocyter. EPI-NCSC är lätt åtkomliga i den håriga huden och kan isoleras som en mycket ren population av stamceller. Den här videon ger en detaljerad protokoll för att förbereda mus EPI-NCSC kulturer från morrhår folliklar. Den morrhår pad av en vuxen mus tas bort, och morrhår folliklar dissekeras. Hårsäckarna skärs därefter längden och sedan tvärs över och under bula regionen. Utbuktningen tas bort från collagen kapseln och placeras i en kultur tallrik. EPI-NCSC börja att emigrera från bula explants 3 till 4 dagar senare.
Protocol
Discussion
I kraft av sin vandrande förmåga, kan EPI-NCSC vara isolerade som en mycket ren population av stamceller, som kan expanderas in vitro. Som embryonala rester i en vuxen plats, EPI-NCSC är potentiellt attraktiva kandidater för framtida cellterapi ersättning, medicinsk teknik och / eller regenerativ medicin. Vi har testat EPI-NCSC i en musmodell av ryggmärgsskada, där de visar önskvärda egenskaper. Genom profilering av genuttryck med LongSAGE (www.ncbi.nlm.nih.gov / geo, serienummer GSE4680) visade vi att, som väntat, embryonala neur…
Acknowledgements
Med stöd av: USPHS bidrag NS38500, National Institute of neurologiska sjukdomar och stroke, NIH, USA, medicinsk teknik Alliansen sydöstra Wisconsin, Milwauke, WI, USA; Bryon Riesch Förlamning Foundation, Milwaukee, WI, USA; Fraternal beställa av Eagles, Midwest kapitel , USA, National ryggmärgsskada Association, Milwaukee kapitel, USA, nordöstra England Stem Cell Institute, universitetet i Newcastle, Storbritannien.
References
- Sieber-Blum, M., Grim, M., YF, H. u., Szeder, V. Pluripotent neural crest stem cells in the adult hair follicle. Dev. Dyn. 231, 258-269 (2004).
- Sieber-Blum, M., Grim, M., Tuan, R., Grim, M. The adult hair follicle – cradle for pluripotent neural crest stem cells. Birth Defects Research (Part C). 72, 162-172 (2004).
- Sieber-Blum, M., Schnell, L., Grim, M., Schneider, R., Schwab, M. E. Characterization of epidermal neural crest stem cell (EPI-NCSC) grafts in the lesioned spinal cord. Pub. 32, 67-81 (2006).
- Hu, Y. F., Zhang, Z. -. J., Sieber-Blum, M. An epidermal neural crest stem cell (EPI-NCSC) molecular signature. Stem Cells. 24, 2692-2702 (2006).
