Summary

Fare Epidermal Sinir Crest Kök Hücre (EPI-NCSC) Kültürler

Published: May 09, 2008
doi:

Summary

Burada fare epidermal nöral krest kök hücreleri (EPI-NCSC) izole etmek için yöntem gösteriyor. Tekniği içerir mikro diseksiyon, bıyık kıl follikülleri, şişlik izole ve doku kültürü içine placeing. 4 gün – 3 gün içinde EPI-NCSC alt tabaka üzerine çıkıntı eksplantlar göç etmeye başlar.

Abstract

EPI-NCSC yetişkin bir konuma, saç köklerinin şişkinliği embriyonik nöral krest kalıntıları vardır. Onlar multipotent kök hücreleri nöronların, sinir destekleyen hücreler, düz kas hücreleri, kemik / kıkırdak hücreleri ve melanositler de dahil olmak üzere geniş bir yelpazede, farklılaşmış hücre türleri oluşturmak için fizyolojik özelliği vardır. EPI-NCSC saçlı deride kolaylıkla erişilebilir ve kök hücreler, son derece saf bir nüfus olarak izole edilebilir. Bu video bıyık kıl follikülleri fare EPI-NCSC kültürlerin hazırlanması için ayrıntılı bir protokol sağlar. Yetişkin bir farenin bıyık ped kaldırılır ve bıyık kıl follikülleri diseke. Folikülleri sonra şişkinliği bölgenin altında ve üstünde boydan boya ve daha sonra enine kesilir. Çıkıntı kollajen kapsül kaldırılır ve bir kültür plaka yerleştirilir. Epi-NCSC şişkinliği eksplantlar 3 ila 4 gün sonra göç etmeye başlar.

Protocol

Yetişkin Fare Whisker foliküllerin Bulge diseksiyonu Biz 10 hafta ile 6 ay eski fareler kullanın. Genç farelerin, genellikle daha fazla hücre verim. Fare ve betadin (iyot çözeltisi) ve yaklaşık 3 dakika boyunca hidrojen peroksit (eczane) 1:1 karışımın içine daldırın tüm hayvan Euthanize. Squirt tüm fare,% 75 etanol ile özellikle yüz bölgesi, ve laminer akış kaput diseksiyon mikroskobu fare taşımak. Saç soğanı içine kesme, HBSS havuz ve dikkatle kaçınara…

Discussion

Onların göç yeteneği sayesinde, EPI-NCSC, kök hücreler, in vitro açılabilir son derece saf bir nüfus olarak izole edilebilir. Yetişkin bir yerde embriyonik kalıntıları olarak, EPI-NCSC gelecek hücre replasman tedavileri, biyomedikal mühendislik ve / veya rejeneratif tıp için çekici potansiyel adaylardır. Arzu özellikleri göstermektedir Biz, spinal kord yaralanması bir fare modelinde EPI-NCSC test ettik. LongSAGE (www.ncbi.nlm.nih.gov / coğrafi, seri numarası GSE4680) gen ekspresyon profili sayesinde gösterdi ki, bek…

Acknowledgements

Güneydoğu Wisconsin Biyomedikal Teknoloji Alliance Milwauke, WI, ABD; Bryon Riesch Felç Vakfı'nın, Milwaukee, WI, ABD; Eagles Kardeş Sipariş, Midwest Bölüm USPHS hibe NS38500, Ulusal Nörolojik Hastalıklar Enstitüsü ve İnme, NIH, ABD tarafından desteklenen: ABD Ulusal Spinal Kord Yaralanma Birliği, Milwaukee Bölüm, ABD, Kuzey Doğu İngiltere Kök Hücre Enstitüsü, Newcastle Üniversitesi, Birleşik Krallık.

References

  1. Sieber-Blum, M., Grim, M., YF, H. u., Szeder, V. Pluripotent neural crest stem cells in the adult hair follicle. Dev. Dyn. 231, 258-269 (2004).
  2. Sieber-Blum, M., Grim, M., Tuan, R., Grim, M. The adult hair follicle – cradle for pluripotent neural crest stem cells. Birth Defects Research (Part C). 72, 162-172 (2004).
  3. Sieber-Blum, M., Schnell, L., Grim, M., Schneider, R., Schwab, M. E. Characterization of epidermal neural crest stem cell (EPI-NCSC) grafts in the lesioned spinal cord. Pub. 32, 67-81 (2006).
  4. Hu, Y. F., Zhang, Z. -. J., Sieber-Blum, M. An epidermal neural crest stem cell (EPI-NCSC) molecular signature. Stem Cells. 24, 2692-2702 (2006).
check_url/fr/772?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Sieber-Blum, M., Hu, Y. Mouse Epidermal Neural Crest Stem Cell (EPI-NCSC) Cultures. J. Vis. Exp. (15), e772, doi:10.3791/772 (2008).

View Video