תיוג מדרדר לתאי הגנגליון של הרשתית על ידי יישום של זהב Fluoro על פני השטח של Colliculus מעולה
Summary
וידאו זה מתאר את שיטת תיוג מדרדר של RGC ידי יישום fluoro זהב (FG) על פני השטח של מעולה colliculus (SC). טכניקה מערבת קידוח בגולגולת, aspirating קליפת המוח, וליישם ספוג ג'לטין על פני כל הגב של SC.
Abstract
גנגליון רשתית תא (RGC) ספירת חיונית כדי להעריך את ניוון הרשתית במיוחד גלאוקומה. אמין תיוג RGC חיונית להערכת ההשפעות של טיפול כלשהו. בשנת החולדה, על 98% RGCs ידוע הפרויקט colliculus מעולה הנגדי (SC) (פורסטר פיטרס, 1967). יישום fluoro זהב (FG) על פני השטח של SC יכול תווית כמעט כל RGCs, כך שנוכל להתמקד נוירון זה ברשתית הפגיעים ביותר גלאוקומה. FG הוא נלקח על ידי מסופי האקסון של תאים הגנגליון ברשתית והעבירו בילטרלי retrogradely כדי somas שלה ברשתית. השווה עם תיוג מדרדר של RGC ידי הצבת FG בגדם של עצב הראייה transected עבור 2 ימים, התערבות של הישרדות RGC ממוזער. השווה עם כתמים סגולים cresyl כי כתמי RGCs, תאים amacrine ו האנדותל של כלי הדם שכבת הגנגליון ברשתית התא, בשיטה זו תיוג הוא ספציפי יותר RGC. וידאו זה מתאר את שיטת תיוג מדרדר של RGC ידי יישום FG על פני השטח של SC. ניתוחים כוללים קידוח בגולגולת; aspirating קליפת לחשוף את SC ויישום ספוג ג'לטין על פני כל הגב של SC מוצגים. עצות שימושיות למניעת דימום תוך גולגולתי השאיפה מסיבי של SC קיבלו.
Protocol
Discussion
- למה להשתמש בשיטה כירורגית עבור לספור הגנגליון ברשתית התא?
ב עכברוש על 98% מכלל התאים הגנגליון ברשתית (RGC) ידועים הפרויקט colliculus מעולה הנגדי (SC). יישום fluoro זהב על פני השטח של SC יכול תווית כמעט כל RGCs, כך אנחנו יכולים להתמקד נוירון זה ברשתית הפגיעים ביותר ?…
Acknowledgements
המחברים מבקשים להודות על התמיכה מהתוכנית גלאוקומה הלאומי של הקרן האמריקאית לבריאות עוזר.
References
- Ahmed, A. K. M. F., Dong, K., Sugioka, K., Yamadori, T. Retrograde double labeling of retinal ganglion cells in the newborn and adult albino rat. Neurosci. Protocols. 1, 1-11 (1996).
- Chan, H. C., Chang, R. C. C., Ip, A. K. C., Chiu, K., Yuen, W. H., Zee, S. Y., So, K. F. Neuroprotective effects of Lycium barbarum Lynn on protecting retinal ganglion cells in an ocular hypertension model of glaucoma. Experimental Neurology. 203, 269-273 (2007).
- Forrester, J., Peters, A. Nerve fibers in the optic nerve of rat. Nature. 214, 245-247 (1967).
- Ji, J. Z., Elyaman, W., Yip, H. K., Lee, V. W. H., Yick, L. W., Hugon, J., So, K. F. CNTF promotes survival of retinal ganglion cells after induction of ocular hypertension in rats: the possible involvement of STAT3 pathway. European Journal of Neuroscience. 19, 265-272 (2004).
- Li, R. S., Chen, B. Y., Tay, D. K., Chan, H. H. L., Pu, M. L., So, K. F. Melanopsin-Expressing Retinal Ganglion Cells Are More Injury-Resistant in a Chronic Ocular Hypertension Model. Investigative. Ophthalmology & Visual Science. 47, 2951-2958 (2006).
