El modelo de encefalopatía isquémica hipóxica de la isquemia perinatal
Summary
El modelo de rata postnatal para la lesión cerebral hipóxico-isquémica es un modelo bien establecido de los derechos humanos neonatal encefalopatía hipóxica isquémica (EHI). En este artículo se describe el modelo de HIE en crías de ratas post-natal.
Abstract
Encefalopatía hipóxico-isquémica (EHI) es la consecuencia de asfixia sistémica que ocurre desde el nacimiento. Veinticinco por ciento de los recién nacidos con EHI desarrollan secuelas neuropsicológicas graves y permanentes, como retraso mental, parálisis cerebral y epilepsia. Los resultados de HIE son devastadores y permanentes, por lo que es fundamental para identificar y desarrollar estrategias terapéuticas para reducir el daño cerebral en los recién nacidos con EHI. A tal fin, el modelo de rata neonatal para la lesión cerebral hipóxico-isquémica se ha desarrollado el modelo de esta condición humana. El modelo de HIE fue validado por primera vez por Vannucci et al 1, y desde entonces ha sido ampliamente utilizada para identificar los mecanismos de lesión cerebral como consecuencia de la hipoxia-isquemia perinatal 2 y para probar posibles intervenciones terapéuticas 3,4. El modelo de HIE es un proceso de dos etapas y consiste en la ligadura de la arteria carótida común izquierda seguido por la exposición a un ambiente hipóxico. El flujo sanguíneo cerebral (FSC) en el hemisferio ipsilateral a la arteria carótida liga no disminuye por el flujo sanguíneo colateral a través del polígono de Willis, pero con la tensión de oxígeno baja, la CBF en el hemisferio ipsilateral y disminuye significativamente los resultados en la lesión isquémica unilateral . El uso de 2,3,5-trifenil tetrazolio cloruro (TTC) para teñir e identificar el tejido cerebral isquémico se desarrolló originalmente para los modelos adultos de la isquemia cerebral de roedores 5, y se utiliza para evaluar el grado de infarctin cerebral a los puntos de tiempo de hasta 72 horas después del evento isquémico 6. En este video, se demuestra el modelo de lesión hipóxico-isquémica en cerebro de rata postnatal y la evaluación del tamaño del infarto mediante la tinción de TTC.
Protocol
Discussion
El modelo de roedores postnatal HIE es un modelo establecido que la hipoxia cerebral recapitula que ocurren en el periodo perinatal en los recién nacidos. Amplia estudios de caracterización histológica y inmunocitoquímicos han demostrado que los roedores 7 días de edad tiene la madurez cerebral similar a un modelo de siete en el tercer trimestre el feto humano. El modelo de HIE roedores ha sido muy informativo para entender los mecanismos de la lesión cerebral de la hipoxia perinatal 2, donde las intervenciones, …
Acknowledgements
Financiado por la American Heart Association y March of Dimes.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Sprague-Dawley Rat Pups | Animal | Charles River Laboratories | ||
| Isoflurane | Surgery | Aerrane,Baxter | ||
| 8% Oxygen/ 92% Nitrogen Gas | Surgery | Airgas | ||
| 2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride | Reagent | Sigma-Aldrich | T8877 | |
| Phosphate buffered saline (PBS) pH 7.4 | Reagent | Gibco/Invitrogen | ||
| Paraformaldehyde | Reagent | Sigma-Aldrich | P6148 |
References
- Rice, J. E., Vannucci, R. C., Brierley, J. B. The influence of immaturity on hypoxic-ischemic brain damage in the rat. Annals of neurology. 9 (2), 131-141 (1981).
- Vannucci, R. C., Vannucci, S. J. Perinatal Hypoxic-Ischemic Brain Damage: Evolution of an Animal Model. Dev Neurosci. 27 (2-4), 81-86 (2005).
- Bona, E., Hagberg, H., Loberg, E. M. Protective effects of moderate hypothermia after neonatal hypoxia-ischemia: short- and long-term outcome. Pediatric research. 43 (6), 738-738 (1998).
- Trescher, W. H., Ishiwa, S., Johnston, M. V. Effects of hypothermia and hyperthermia on attentional and spatial learning deficits following neonatal hypoxia-ischemic insult in rats. Behavioural brain research. 151 (1-2), 209-209 (2004).
- Mishima, K., Ikeda, T., Yoshikawa, T. Brief post-hypoxic-ischemic hypothermia markedly delays neonatal brain injury. Brain development. 19 (5), 326-326 (1997).
- Young, R. S., Olenginski, T. P., Yagel, S. K. The effect of graded hypothermia on hypoxic-ischemic brain damage: a neuropathologic study in the neonatal rat. Stroke; a journal of cerebral circulation. 14 (6), 929-929 (1983).
- Bederson, J. B., Pitts, L. H., Germano, S. M., et al. Evaluation of 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride as a stain for detection and quantification of experimental cerebral infarction in rats. Stroke; a journal of cerebral circulation. 17 (6), 1304-1304 (1986).
- Cai, J., Kang, Z., Liu, W. W. Hydrogen therapy reduces apoptosis in neonatal hypoxia-ischemia rat model. Neuroscience letters. 441 (2), 167-167 (2008).
- Grow, J., Barks, J. D. Pathogenesis of hypoxic-ischemic cerebral injury in the term infant: current concepts. Clinics in perinatology. 29 (4), 585-585 (2002).
- Aden, U., Halldner, L., Lagercrantz , H., et al. Aggravated brain damage after hypoxic ischemia in immature adenosine A2A knockout mice. Stroke; a journal of cerebral circulation. 34 (3), 739-739 (2003).
