Journal
/
Biologie
/
Identificação de complexos de proteínas com proteômica quantitativa em S. cerevisiae
Journal JoVE
Biologie
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Biologie
Identification of protein complexes with quantitative proteomics in S. cerevisiae

Identificação de complexos de proteínas com proteômica quantitativa em S. cerevisiae

DOI:
10.3791/1225-v

•

11:12 min

•

March 04, 2009

•

, ,
1Department of Cellular and Physiological Sciences,University of British Columbia – UBC, 2Department of Biochemistry and Molecular Biology,University of British Columbia – UBC

Chapitres

  • 00:00Titre
  • 00:45Introduction
  • 01:17Preparation of the Bait and SILAC Control Strain
  • 02:44Grinding of Cells
  • 04:05Pre-clearing Cell Lysate
  • 05:51Eluting From IgG Beads by TEV Protease Cleavage
  • 06:45Trichloroacetic Acid (TCA) Precipitation
  • 08:11EtOH/ Acetate Precipitation
  • 09:00Sample Analysis by Western Blotting and/ or Silver Staining
  • 09:30Representative Results/ Outcome
  • 10:15Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Aqui nós descrevemos uma nova técnica proteômica quantitativa para a identificação de complexos de proteína em Saccharomyces cerevisiae. Neste estudo, nós utilizamos o método SILAC juntamente com purificação de afinidade seguido por espectrometria de massa para identificar com alta especificidade dos parceiros de ligação de uma proteína ER, Scs2p.

Tags

Protein ComplexesQuantitative ProteomicsS. CerevisiaeLipidsCellular MembranesCompartmentalizationIntracellular Signaling MoleculesNonvesicular RoutesMembrane Contact Sites (MCSs)Endoplasmic Reticulum (ER)Plasma Membrane (PM)Lipid-synthesizing EnzymesLipid TrafficER-PM MCSsYeast ModelEukaryotesScs2pMolecular PartnersGel ElectrophoresisIn-gel DigestionMass Spectrometry

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

check_url/fr/1225?article_type=v

Ensaio para a Adesão e Invasão Agar em S. cerevisiae
check_url/fr/1225?article_type=v

Proteômica para identificar proteínas Interagindo com P2X2 Canais Ligand-Gated Cation
check_url/fr/1225?article_type=v

Um método de alto rendimento para estudar a morfologia global organela em S. cerevisiae
check_url/fr/1225?article_type=v

Phosphoproteomics quantitativa em ácidos graxos estimulada Saccharomyces cerevisiae</em
check_url/fr/1225?article_type=v

Estudando Idade-dependente Instabilidade Genômica usando o S. cerevisiae Modelo Lifespan cronológica
check_url/fr/1225?article_type=v

Identificação de complexos de proteínas em<em> Escherichia coli</em> Utilizando a purificação por afinidade sequencial Peptide em combinação com espectrometria de massa tandem
check_url/fr/1225?article_type=v

Purificação Citometria de Fluxo com base em<em> S. cerevisiae</em> Zigotos
check_url/fr/1225?article_type=v

Visualização e análise de moléculas de mRNA Usando Fluorescência<em> In Situ</em> A hibridação em<em> Saccharomyces cerevisiae</em
check_url/fr/1225?article_type=v

Ensaios para Monitoramento juntamente redobramento de proteínas em<em> Saccharomyces cerevisiae</em
check_url/fr/1225?article_type=v

Identificação de modificações pós-translacionais de Complexos de proteína vegetal

Read Article