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Zebrafish Whole Mount High-Resolution Double Fluorescent In Situ Hybridization
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Zebrafish intero monte ad alta risoluzione doppia fluorescente In Situ Ibridazione

DOI:
10.3791/1229-v

•

12:31 min

•

March 25, 2009

•

,
1Department of Molecular, Cellular and Developmental Biology,Yale University

Chapitres

  • 00:00Titre
  • 01:00Introduction
  • 01:27Fixing and Dechorionating Embryos
  • 03:10Permeabilizing the embryos
  • 03:51Hybridization
  • 05:37Antibody labeling
  • 09:10Propidium iodide staining and detection
  • 10:31Outcome and Results
  • 11:41Conclusion

Summary

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Montare tutto ibridazione in situ è ​​una delle tecniche più utilizzate in biologia dello sviluppo. Qui, presentiamo una ad alta risoluzione doppio fluorescente in protocollo ibridazione in situ per analizzare il modello preciso espressione di un singolo gene e per determinare la sovrapposizione dei domini di espressione di due geni. Includiamo un propidio ioduro nucleare contro-macchia per evidenziare l'organizzazione dei tessuti.

Tags

ZebrafishWhole MountHigh-resolutionDouble FluorescentIn Situ HybridizationBiologie du développementGene ExpressionGene OverlapAlkaline PhosphataseNBT/BCIPFast RedDigoxygeninFluorescein Labeled ProbesTyramide Signal Amplification (TSA)Nuclear StainsPropidium IodideFluorescence ImmunohistochemistryReactive Fluorescent SubstrateTyrosine ResiduesAntisense RiboprobeStaining PatternsLaser Scanning Confocal MicroscopyNascent TranscriptsChromosomal LociNuclear StainingCytoplasmic Staining

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