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Fosfoproteomica quantitativa in acidi grassi Stimolati Saccharomyces cerevisiae</em
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Journal JoVE Biologie
Quantitative Phosphoproteomics in Fatty Acid Stimulated Saccharomyces cerevisiae
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Fosfoproteomica quantitativa in acidi grassi Stimolati Saccharomyces cerevisiae</em

DOI:
10.3791/1474-v

•

15:41 min

•

October 12, 2009

•

,
1Institute for Systems Biology

Chapitres

  • 00:00Titre
  • 00:44Introduction
  • 01:02Growing Isotopically Light and Isotopically Heavy Yeast Cells
  • 03:06Lysing Cells
  • 06:35Isolation and Fractionation of Peptides
  • 06:38Alkylation and Reduction
  • 10:32Desalting
  • 11:54Peptide Fractionation
  • 13:11Enrichment of Phosphopeptides
  • 14:51Representative Results
  • 15:14Conclusion

Summary

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Descrizione di una procedura di fosforilazione quantitativa, utilizzando cryolysis, solubilziation urea, frazionamento HILIC e arricchimento IMAC di peptidi fosforilati.

Tags

Quantitative PhosphoproteomicsFatty Acid StimulationSaccharomyces CerevisiaeGrowth And StimulationOleateIsotopically Heavy And Light CellsCryolysis ProcedureBall Mill GrinderUrea SolubilizationMetabolically Inactive StatePhosphorylation PreservationPreventing ReorientationCell LysisReductionAlkylationTrypsin DigestionDesalting On C18 ColumnsSample Complexity ReductionFractionation Using Hydrophilic Interaction Chromatography (HILIC)Phosphopeptides Elution ProfileImmobilized Metal ChromatographyCharge-based AffinitiesMass Spectrometry Analysis

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