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Mesure du taux plasmatique des protéines membranaires par endocytique Biotinylation réversible
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE Biologie
Measuring Plasma Membrane Protein Endocytic Rates by Reversible Biotinylation
DOI:

11:32 min

December 23, 2009

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Chapitres

  • 00:00Titre
  • 00:56Introduction
  • 01:20Cell Culture and Solution Preparation
  • 03:37Biotinylation, Quenching and Internalization of Proteins
  • 07:30Protein Assay, Affinity Chromatography and SDS-Page Analysis of Proteins
  • 09:49Dopamine Transporter Internalization
  • 11:02Conclusion

Summary

Traduction automatique

Endocytose régulée régit les niveaux de surface des cellules d'expression de la majorité des protéines membranaires. Ici, nous utilisons réductible, réactifs à membrane biotinylation imperméants pour mesurer le taux d'endocytose du transporteur de la dopamine (DAT), une protéine membranaire polytopique. La méthode facilite une approche simple pour mesurer le taux d'endocytose de la plupart des protéines de la membrane plasmique.

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