Journal
/
Biologie
/
Split-ubiquitin Baserat Membrane Jäst Två Hybrid (MYT) System: ett kraftfullt verktyg för att identifiera Protein-protein interaktioner
Journal JoVE
Biologie
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Biologie
Split-Ubiquitin Based Membrane Yeast Two-Hybrid (MYTH) System: A Powerful Tool For Identifying Protein-Protein Interactions
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Split-ubiquitin Baserat Membrane Jäst Två Hybrid (MYT) System: ett kraftfullt verktyg för att identifiera Protein-protein interaktioner

DOI:
10.3791/1698-v

•

14:04 min

•

February 01, 2010

•

, , ,
1Department of Biochemistry,University of Toronto, 2Department of Molecular Genetics,University of Toronto, 3Terrence Donnelly Centre for Cellular and Biomolecular Research (CCBR),University of Toronto

Chapitres

  • 00:00Titre
  • 01:22Introduction
  • 01:41Selection of Bait and Appropriate MYTH System
  • 03:04Generation of tMYTH Baits by Gap Repair
  • 03:07a. Vector Preparation and Amplification of Gene of Interest
  • 05:30b. Yeast Transformation and Recovery of Bait Plasmid DNA
  • 07:03Bait Validation
  • 08:10MYTH Screening
  • 08:12a. Large Scale Yeast Transformation
  • 11:31b. Bait Dependency Test
  • 12:54Representative Results/ Outcome
  • 13:12Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Myt tillåter känslig detektion av transienta och stabil interaktioner mellan proteiner som uttrycks i modellen organismen Saccharomyces cerevisiae. Det har med framgång använts för att studera exogena och jäst integrerade membranproteiner i syfte att identifiera sina samverkande partner i en hög genomströmning sätt.

Tags

Split-ubiquitinMembrane Yeast Two-hybridProtein-protein InteractionsMYTH SystemFull-length Transmembrane ProteinsSaccharomyces CerevisiaeBait ProteinPrey ProteinsUbiquitin MoietiesArtificial Transcription FactorPseudo-ubiquitin MoleculeDeubiquitinating EnzymesReporter Gene Expression

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

Imaging Protein-protein interaktioner In vivo</em

Medverkande Kromosom Trap för att identifiera långväga DNA interaktioner

Modifierad jäst-Two-Hybrid System för att identifiera proteiner Interagera med Growth Factor Progranulin

Ett protokoll för identifiering av protein-proteininteraktioner Baserat på<sup> 15</sup> N metabolisk märkning, immunoutfällning, kvantitativa masspektrometri och Affinity modulering

Identifiera protein-proteininteraktion i<em> Drosophila</em> Vuxen Heads av Tandem Affinity Purification (TAP)

Omvänd jäst två-hybridsystemet för att identifiera Mammalian Nuclear Receptor Stoder som interagerar med ligander och / eller-antagonister

Capture Compound masspektrometri - Ett kraftfullt verktyg för att identifiera nya c-di-GMP effektorproteiner

Undersökning av protein-proteininteraktioner i levande celler med hjälp Bioluminescence Resonance Energy Transfer

Sondering hög densitet funktionellt protein Microarrays att upptäcka protein-proteininteraktioner

Identifiera protein-proteininteraktion webbplatser Använda peptid Arrays

Read Article