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速度論と構造機能解析のアフィニティ定量のための適切なタンパク質濃度の重要性
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE Biologie
The Importance of Correct Protein Concentration for Kinetics and Affinity Determination in Structure-function Analysis
DOI:

19:16 min

March 17, 2010

Chapitres

  • 00:00Titre
  • 01:38Introduction
  • 02:30Experimental Design
  • 03:58Immobilization of the Ligand Papain for CFCA Analysis
  • 07:34Determining Cystatin B Concentration Using the CFCA Assay
  • 11:07Measuring the Kinetics of Cystatin B binding to Papain
  • 17:13CFCA assay and Kinetics of Cystatin B binding to Papain Representative Results
  • 18:47Conclusion

Summary

Traduction automatique

我々は、ラベルフリーの動力学的特性によってパパインには、いくつかのシスタチンBの変異体の結合の構造機能解析のためのビアコアのX100を使用してタンパク質相互作用解析を適用する。キャリブレーションフリーの濃度分析(シミュレーションプロジェクト)は、検量線を必要とせずに保持結合活性を有するタンパク質の濃度を測定する。我々はシミュレーションプロジェクトを使用して濃度のその確認は、動態解析の信頼性を高め、速度定数が確実に組換えタンパク質の活性が低下している場合でも決定できることを示している。

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