Waiting
Traitement de la connexion…

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Encyclopedia of Experiments
Encyclopedia of Experiments: Biology

Un abonnement à JoVE est nécessaire pour afficher ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.

ארבעה כיווני Olfactometer Assay

 
Click here for the English version

ארבעה כיווני Olfactometer Assay: שיטה להערכת תגובות אודורנט-Cued ב Drosophila

Article

Transcript

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the English version.

- מד ריח בעל ארבעה כיווניים הוא תא סגור עם יציאות חד-כיווניות בכל פינה, שדרכו הוא יכול לספק עד ארבעה ריחות, יצירת רבעים עם פרופילי ריח ברורים.

חשוף את הזבובים לאוויר נקי והתבונן בתנועותיהם כדי לוודא שאף ריח אינו מזהם את הריח ומשפיע על התנהגות הזבובים.

זבובים נוטים להימנע מרביעים עם ריחות דוחים תוך כדי תנועה והתיישבות ברבעים עם ריחות אטרקטיביים.

בפרוטוקול הבא, נשתמש במד ריח של ארבעה רבעים עם מערכת אספקת אוויר כדי לנתח התנהגות זבובים בתגובה לאתיל פרופיונט, ריח דוחה וחומץ סיידר תפוחים, שהוא אטרקטיבי.

- לפחות חמש דקות מראש, לעבור על בקר הטמפרטורה ולהגדיר אותו 25 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, לחבר את תאי הריח לזירה באמצעות צינור פלסטיק.

- זבובים רגישים מאוד לזרימת אוויר, וזה קריטי כי זרימת האוויר עבור כל רבע מאומת לפני כל ניסוי.

- עכשיו, לנקות את הזירה ואת צלחות הזכוכית באמצעות 70% אתנול.

כעת, הנח את הזירה העמוסה באור לתוך התא ההדוק.לאחר מכן, חבר את ארבעת זרמי האוויר השולטים לכל פינת זירה.

לאחר תקופת התאקלמות, הפעל ניסוי בקרה של 5 עד 10 דקות שבו זבובים נחשפים לארבעה זרמי אוויר בקרה.

- זה קריטי כדי לבדוק את ההתנהגות של זבובים שליטה רק אוויר נקי. זה יהיה במהירות לוודא כי כל תנאי הרקע הם נורמליים. דליפת אור, חוסר איזון טמפרטורה, זירה מוטה, או זיהום ריח יכול כל לגרום לבעיות.

- במידת הצורך, להשליך את הזבובים ולנקות את הזירה שוב. להחליף את כל הצינור. המשך לחזור על מבחן הבקרה עם קבוצות חדשות עד שבעלי החיים לא יראו העדפה לאף אחד מארבעת הרבעים. לאחר מכן, חבר את תא ריח הבדיקה להתקנה באמצעות שסתום תלת כיווני, או חבר מחדש את הצינור והפעל ניסוי בדיקה במשך 5 עד 10 דקות.

בין הבדיקות, להשליך את הזבובים, לנקות את הזירה ואת לוחות הזכוכית עם 70% אתנול, ולהחליף את צינורות המחבר.

- אם מספר ניסויים מופעלים באותו יום, לשלם טיפול קיצוני כדי להבטיח כי אין ריח נשאר במערכת מן הריצה הקודמת.

Tags

ערך ריק הנפקה
Read Article

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter