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1Department of Pathology, Hershey Medical Center,Pennsylvania State University, 2Department of Chemistry,Pennsylvania State University, 3Departments of Pathology, and Biochemistry and Molecular Biology, Hershey Medical Center,Pennsylvania State University, 4Materials Research Institute,Pennsylvania State University
Chapitres
- 00:04Titre
- 00:12Introduction
- 01:39Preparation of PF Library-DNA Fragments
- 03:26Preparation of S100B-bound Beads
- 04:55Selection & Recovery of Aptamers
- 06:40TOPO Cloning and Sequencing
- 07:17Sandwich Binding Assays
- 09:11Representative Results
- 10:35Conclusion
SELEX protocoles comprennent plusieurs tours de sélection, dont chacun nécessite la régénération des ligands, qui exigent à leur tour des séquences d'amorces flanquant les régions fixes bibliothèque aléatoire. Ces séquences d'amorces fixes peuvent interférer avec le processus de sélection (faux positifs et négatifs). Nous présentons ici un apprêt sans protocole.
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Primer-Free Aptamer SelectionRandom DNA LibraryAptamersOligonucleotidesDNARNAAffinitiesAntibodiesIn Vitro Selection ProcessSystematic Evolution Of Ligands By EXponential Enrichment (SELEX)TargetsSmall MoleculesProteinsMacromoleculesIn Vivo Diagnostic ApplicationsTherapeutic ApplicationsSpecificitySynthesizedProcessing ConditionsImmunogenicitySizeNucleotides (nt)Nucleic Acid LibrariesRandomized RegionsPrimer SitesSelection Process ComplicationsBioinformatics Approaches
