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Blu nativi poliacrilammide gel elettroforesi (BN-PAGE) per l'analisi di complessi multiproteici da lisati cellulari
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Journal JoVE Biologie
Blue Native Polyacrylamide Gel Electrophoresis (BN-PAGE) for Analysis of Multiprotein Complexes from Cellular Lysates
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Blu nativi poliacrilammide gel elettroforesi (BN-PAGE) per l'analisi di complessi multiproteici da lisati cellulari

DOI:
10.3791/2164-v

•

12:03 min

•

February 24, 2011

•

, ,
1Spemann Graduate School of Biology and Medicine (SGBM),University of Freiburg, 2Centre for Biological Signalling Studies (bioss) and Biology III, Faculty of Biology,University of Freiburg, 3Department of Molecular Immunology,Max-Planck-Institute of Immunology and Epigenetics

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:21Introduction
  • 01:58Preparation of Dialyzed Cell Lysate
  • 04:48Pouring of Blue Native-gels
  • 07:04Separation of Dialyzed Cell Lysate by Blue Native-PAGE
  • 07:53Second Dimension SDS-PAGE
  • 09:25Representative Results for Blue Native-PAGE Analysis of Multiprotein Complexes from Cellular Lysates
  • 11:18Conclusion

Summary

Traduction automatique

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In questo video, si descrive la caratterizzazione di complessi multiproteici (PPM) di blu elettroforesi su gel di poliacrilammide nativo (BN-PAGE). In una prima dimensione, dializzati lisati cellulari sono separati da BN-PAGE per identificare i singoli PPM. In una seconda dimensione SDS-PAGE, PPM di interesse sono ulteriormente suddivisi per analizzare i loro elettori mediante immunoblotting.

Tags

Blue Native Polyacrylamide Gel ElectrophoresisBN-PAGEMultiprotein ComplexesCell SignallingProtein-protein Interaction NetworksNative ConditionsResolutionGel FiltrationSucrose Density UltracentrifugationMPC SizeCompositionRelative AbundanceHydrodynamic Size And ShapePolyacrylamide MatrixCellular LysatesLysate DialysisFirst Dimension BN-PAGESecond Dimension SDS-PAGE

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