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in vivoおよびアダプター、クラスリンの相互作用のin vitro試験
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE Biologie
In vivo and in vitro Studies of Adaptor-clathrin Interaction
DOI:

17:14 min

January 26, 2011

, , ,

Chapitres

  • 01:34Introduction
  • 02:10Generation of GFP-tagged Sla1 and Sla1 Clatherin-binding Mutant Yeast Strains
  • 03:22Fluorescence Microscopy
  • 05:09Fluorescence Image Analysis
  • 06:41Preparation of Yeast Cytosolic Extract
  • 09:54GST-fusion Protein Affinity Assay
  • 11:53Preparation of Total Cell Extract
  • 13:36Co-immunoprecipitation Assay
  • 15:16Representative Results
  • 16:39Conclusion

Summary

Traduction automatique

クラスリン依存性エンドサイトーシスは、貨物の選択とクラスリン被覆のアセンブリを調整するアダプタータンパク質に依存します。ここではモデルとして酵母エンドサイトーシスのアダプタータンパク質のSla1pを使用してアダプタクラスリンの物理的相互作用および生細胞イメージングのアプローチを研究するための手順を説明します。

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