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Imágenes en vivo del calcio celular combinado con el silenciamiento de genes mediada por siRNA Identifica Ca 2 + Canales de fugas en la membrana del ER y sus mecanismos de regulación
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Journal JoVE Biologie
Live Cell Calcium Imaging Combined with siRNA Mediated Gene Silencing Identifies Ca2+ Leak Channels in the ER Membrane and their Regulatory Mechanisms
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Imágenes en vivo del calcio celular combinado con el silenciamiento de genes mediada por siRNA Identifica Ca 2 + Canales de fugas en la membrana del ER y sus mecanismos de regulación

DOI:
10.3791/2730-v

•

13:40 min

•

July 07, 2011

•

, , ,
1Medical Biochemistry and Molecular Biology,Saarland University, 2Experimental and Clinical Pharmacology and Toxicology,Saarland University

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 02:16Preparation of Stock Solutions
  • 03:03Gene Silencing in HeLa Cells
  • 05:39Complementation of HeLa Cells
  • 07:07Live Cell Calcium Imaging
  • 09:58Representative Calcium Imaging Results
  • 12:58Conclusion

Summary

Traduction automatique

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El retículo endoplasmático juega un papel clave en la biogénesis de proteínas y en la homeostasis del calcio. Hemos establecido un sistema experimental que nos permite abordar el papel de los canales de Ca2 + de fugas y para caracterizar sus mecanismos de regulación putativo. Este sistema consiste en el silenciamiento de genes mediada por siRNA y de células vivas imágenes de Ca2 +.

Tags

Live Cell Calcium ImagingSiRNA Mediated Gene SilencingCa2+ Leak ChannelsER MembraneRegulatory MechanismsEndoplasmic ReticulumProtein BiogenesisCalcium SignallingHeterotrimeric Sec61 ComplexNascent PolypeptidesPuromycinER Luminal Protein BiPExperimental SystemCoding RegionUntranslated Region (UTR)SEC61A1 GeneComplementation AnalysisIRES-GFP Vector

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