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Biologie
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加上质谱肽免疫亲和富集的蛋白质定量
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE
Biologie
Quantification of Proteins Using Peptide Immunoaffinity Enrichment Coupled with Mass Spectrometry
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加上质谱肽免疫亲和富集的蛋白质定量
DOI:
10.3791/2812-v
•
06:09 min
•
July 31, 2011
•
Lei Zhao*
1
,
Jeffrey R. Whiteaker*
1
,
Matthew E. Pope
,
Eric Kuhn
,
Angela Jackson
,
N. Leigh Anderson
,
Terry W. Pearson
,
Steven A. Carr
,
Amanda G. Paulovich
1
Clinical Research Division
,
Fred Hutchinson Cancer Research Center – FHCRC
,
2
Department of Biochemistry and Microbiology
,
University of Victoria
,
3
Broad Institute of MIT and Harvard
,
4
Genome BC Proteomics Centre
,
University of Victoria
,
5
Plasma Proteome Institute
Chapitres
00:05
Titre
01:05
Trypsin Enzymatic Digestion and Cleanup
03:17
Peptide Immunoaffinity Enrichment
04:45
Analysis by Multiple Reaction Monitoring – Mass Spectrometry
05:24
MRM of a SISCAPA-Enriched Sample
05:44
Conclusion
Summary
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稳定同位素标准和捕捉反肽抗体(SISCAPA)夫妇亲和富集稳定同位素稀释质谱(MRM - MS)的肽作为代理人为各自的蛋白质肽的定量测量提供。在这里,我们描述了一个部分自动化的格式使用磁性粒子的协议。
Tags
Quantification
Proteins
Peptide Immunoaffinity Enrichment
Mass Spectrometry
Traditional Immunoassays
SISCAPA
Stable Isotope Standards
Capture By Anti-peptide Antibodies
SRM/MRM-MS
Small Molecules
Protein Concentration
Proteotypic Peptides
Trypsin
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