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La quantification des protéines à l'aide d'enrichissement d'immunoaffinité peptide couplé à la spectrométrie de masse
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Journal JoVE Biologie
Quantification of Proteins Using Peptide Immunoaffinity Enrichment Coupled with Mass Spectrometry
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La quantification des protéines à l'aide d'enrichissement d'immunoaffinité peptide couplé à la spectrométrie de masse

DOI:
10.3791/2812-v

•

06:09 min

•

July 31, 2011

•

, , , , , , , ,
1Clinical Research Division,Fred Hutchinson Cancer Research Center – FHCRC, 2Department of Biochemistry and Microbiology,University of Victoria, 3Broad Institute of MIT and Harvard, 4Genome BC Proteomics Centre,University of Victoria, 5Plasma Proteome Institute

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:05Trypsin Enzymatic Digestion and Cleanup
  • 03:17Peptide Immunoaffinity Enrichment
  • 04:45Analysis by Multiple Reaction Monitoring – Mass Spectrometry
  • 05:24MRM of a SISCAPA-Enriched Sample
  • 05:44Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Normes des isotopes stables et capture par anticorps anti-peptide (SISCAPA) l'enrichissement affinités couples de peptides avec des isotopes stables de dilution spectrométrie de masse (MRM-MS) pour fournir une mesure quantitative des peptides comme substituts pour leurs protéines respectives. Nous décrivons ici le protocole en utilisant des particules magnétiques dans un format partiellement automatisés.

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QuantificationProteinsPeptide Immunoaffinity EnrichmentMass SpectrometryTraditional ImmunoassaysSISCAPAStable Isotope StandardsCapture By Anti-peptide AntibodiesSRM/MRM-MSSmall MoleculesProtein ConcentrationProteotypic PeptidesTrypsin

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