Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Chapitres
- 00:05Titre
- 02:14Preparation of Cells for Labeling with ReAsH/FlAsH
- 04:38Imaging the Cells on a Confocal Microscope
- 05:45Data Analysis
- 10:54Representative Assessment of the ReAsH Reactivity of TC Tagged Kinase Src in live HEK293 Cells
- 11:46Conclusion
Den biarsenical färgämnen Flash och ReAsH binder specifikt till tetracysteine motiv i proteiner och kan selektivt etikett proteiner i levande celler. Nyligen denna märkning strategi har använts för att utveckla sensorer för olika proteiner konformationer eller oligomeric stater. Vi beskriver märkning tillvägagångssätt och metoder för att kvantitativt analysera bindande.
Tags
ReAsHFlAsHLabelingImage AnalysisTetracysteine Sensor ProteinsCellsFluorescent ProteinsProtein TraffickingProtein LocalizationProtein FunctionFusion PartnersConformational ChangeProtein-associationSmall Tag SystemBiarsenical DyesSpecificityLive CellsSteric ConstraintsHost ProteinConformational Change MeasurementProtein-protein InteractionsOligomerization SensorsMutant HuntingtinAggregatesNeuronsHuntington Disease
