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Embalaje VIH o FIV basados ​​en lentivirus Construcciones de expresiones y de transducción de la VSV-G partículas virales pseudotyped
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Journal JoVE Immunologie et infection
Packaging HIV- or FIV-based Lentivector Expression Constructs & Transduction of VSV-G Pseudotyped Viral Particles
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Embalaje VIH o FIV basados ​​en lentivirus Construcciones de expresiones y de transducción de la VSV-G partículas virales pseudotyped

DOI:
10.3791/3171-v

•

11:08 min

•

April 08, 2012

•

, , , ,
1System Biosciences

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:00Intro
  • 02:28Background on Efficient Lentiviral Packaging
  • 03:31Transfecting 293TN Cells with Packaging Plasmids and Expression Constructs
  • 05:47Concentrating the Viral Supernatant
  • 07:36Transduction of HT1080 Control Cells for Viral Titering
  • 09:21Successful Transfection and Transduction
  • 10:19Conclusion

Summary

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Lentiviral vectores de expresión son los medios más eficaces para que expresan establemente diferentes moléculas efectoras o reportero construcciones para dividir y no dividir las células de mamíferos y organismos enteros. A continuación presentamos un protocolo sobre cómo empaquetar construcciones lentivirus de expresión en las partículas pseudoviral y la transducción de las células diana utilizando las partículas pseudoviral.

Tags

HIV-based Lentivector Expression ConstructsFIV-based Lentivector Expression ConstructsTransductionVSV-G Pseudotyped Viral ParticlesPackaging Lentiviral Expression ConstructsTransfection EfficiencyTransient ExpressionPseudoviral ParticlesDifficult-to-transfect CellsPrimary CellsStem CellsDifferentiated CellsLentiviral DeliveryCellular ResponsesChemical TransfectionsTransfection Reagent ToxicityTarget CellsGenomic DNA IntegrationStable ExpressionSmall Hairpin RNA (shRNA)CDNAMicroRNAReporter GeneSelectable MarkerPuromycinGFPPseudoviral ReplicationViral Structural GenesLong Terminal Repeats (LTRs)Lentiviral Packaging

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