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Chapitres
- 00:00Titre
- 01:21Virus Production
- 04:11Titering of Virus
- 06:13Transduction of Human Diploid Fibroblasts
- 07:19FACS Experiments
- 08:50Proteasomal Activity in vivo
- 10:04Conclusion
Un método para supervisar la actividad de ubiquitina-proteasoma en células vivas se describe. Un degron-GFP desestabilizado-(GFP-dgn) y una estable GFP-dgnFS proteína de fusión se generan y se transduce en la célula usando un vector de expresión lentiviral. Esta técnica permite generar un GFP-dgn/GFP-dgnFS estable línea celular que expresa en la que se puede ubiquitina-proteasoma actividad fácilmente evaluada utilizando epifluorescencia o citometría de flujo.
Tags
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