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TransFLP - Eine Methode zur genetischen Veränderung<em> Vibrio cholerae</em> On Natural Transformation und FLP-Rekombination
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TransFLP — A Method to Genetically Modify Vibrio cholerae Based on Natural Transformation and FLP-recombination
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TransFLP - Eine Methode zur genetischen Veränderung<em> Vibrio cholerae</em> On Natural Transformation und FLP-Rekombination

DOI:
10.3791/3761-v

•

12:13 min

•

October 08, 2012

•

1Global Health Institute, School of Life Sciences,Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL)

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:16Preparation of Chitin Flakes
  • 01:39Oligonucleotide Design and Polymerase Chain Reaction
  • 03:45Chitin-induced Natural Transformation
  • 04:59Removal of Selective Cassette(s) by FLP-recombination
  • 05:46Plasmid Curing
  • 06:21Results: Representative TransFLP Modifications of V. cholerae
  • 11:34Conclusion

Summary

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Eine schnelle Methode, um das Genom zu ändern<em> V. cholerae</em> Beschrieben. Diese Änderungen umfassen das Löschen von einzelnen Genen, Gen-Cluster und genomische Inseln sowie die Integration von kurzen Sequenzen (zB Promotorelemente oder Affinitäts-tag-Sequenzen). Das Verfahren basiert auf der natürlichen Transformation und FLP-Rekombination.

Tags

TransFLPGenetically ModifyVibrio CholeraeNatural TransformationFLP-recombinationBacterial ChromosomesReplicative PlasmidsHomology-mediated RecombinationInsertional MutantsPlasmid ExcisionGram-negative BacteriaLevan Sucrase EnzymeSacB GenePre-insertion GenotypeModified GeneTime-consumingCloningHorizontal TransferArtificial TransformationPositive SelectionRapid ManipulationChitin-mediated InductionNatural Competence

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