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TransFLP - um método para modificar geneticamente<em> Vibrio cholerae</em> Com base Transformação Natural e recombinação FLP-
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Chapitres
- 00:05Titre
- 01:16Preparation of Chitin Flakes
- 01:39Oligonucleotide Design and Polymerase Chain Reaction
- 03:45Chitin-induced Natural Transformation
- 04:59Removal of Selective Cassette(s) by FLP-recombination
- 05:46Plasmid Curing
- 06:21Results: Representative TransFLP Modifications of V. cholerae
- 11:34Conclusion
Um método rápido para modificar o genoma de<em> V. cholerae</em> É descrito. Essas modificações incluem a eliminação de genes individuais, grupos de genes e ilhas genômicas, bem como a integração de seqüências curtas (por exemplo, elementos promotor ou afinidade tag-seqüências). O método baseia-se na transformação de recombinação natural e FLP.
Tags
TransFLPGenetically ModifyVibrio CholeraeNatural TransformationFLP-recombinationBacterial ChromosomesReplicative PlasmidsHomology-mediated RecombinationInsertional MutantsPlasmid ExcisionGram-negative BacteriaLevan Sucrase EnzymeSacB GenePre-insertion GenotypeModified GeneTime-consumingCloningHorizontal TransferArtificial TransformationPositive SelectionRapid ManipulationChitin-mediated InductionNatural Competence
