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Uma resolução mais rápida, alta, MTPA-GFP baseada em ensaio de fusão mitocondrial aquisição de dados cinéticos de várias células em paralelo usando microscopia confocal
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Journal JoVE Biologie
A Faster, High Resolution, mtPA-GFP-based Mitochondrial Fusion Assay Acquiring Kinetic Data of Multiple Cells in Parallel Using Confocal Microscopy

Uma resolução mais rápida, alta, MTPA-GFP baseada em ensaio de fusão mitocondrial aquisição de dados cinéticos de várias células em paralelo usando microscopia confocal

DOI:
10.3791/3991-v

•

10:45 min

•

July 20, 2012

•

, , , ,
1Department of Neuroscience, Center for Neuroscience Research,Tufts School of Medicine, 2Department of Internal Medicine, Geriatrics & Gerontology,Wake Forest Baptist Medical Center, 3Department of Medicine,Boston University Medical Center

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:33Imaging Plate Preparation
  • 02:29Imaging Parameters for the Zeiss LSM 710 Confocal Microscope
  • 03:37Optimizing the Imaging Parameters
  • 04:49Mitochondrial-fusion Assay Set-up
  • 07:36Analyzing the PA-GFP Signal Intensity
  • 08:17Results: Representative Mitochondrial-fusion Assays
  • 09:49Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Fusão mitocondrial foi medida seguindo o equilíbrio da GFP matriz segmentada photoconverted através da rede mitocondrial ao longo do tempo. Até agora, apenas uma célula possa ser sujeita a uma análise de longo horas cinética de cada vez. Nós apresentamos um método que mede simultaneamente várias células, acelerando assim o processo de coleta de dados.

Tags

FasterHigh ResolutionMtPA-GFP-based Mitochondrial Fusion AssayKinetic DataMultiple CellsParallelConfocal MicroscopyFusion ActivityPhoto-conversionPhotoactivatable GFP (mtPAGFP)EquilibrationLiving CellsTime Lapse ApproachScale UpAutomateLow Concentration Of TMRESignal IntensityPAGFP Expressing CellsSubcellular QuantificationCytoarchitectural Environment

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