Journal
/
Biologie
/
En protokol til identifikation af protein-protein interaktioner Udfra<sup> 15</sup> N metabolisk mærkning Immunoprecipitation, Kvantitativ massespektrometri og Affinity Modulation
Journal JoVE
Biologie
This content is Free Access.
Journal JoVE Biologie
A Protocol for the Identification of Protein-protein Interactions Based on 15N Metabolic Labeling, Immunoprecipitation, Quantitative Mass Spectrometry and Affinity Modulation

En protokol til identifikation af protein-protein interaktioner Udfra<sup> 15</sup> N metabolisk mærkning Immunoprecipitation, Kvantitativ massespektrometri og Affinity Modulation

DOI:
10.3791/4083-v

•

14:44 min

•

September 24, 2012

•

, , , , ,
1Max Planck Institute of Molecular Plant Physiology, 2University of Kaiserslautern

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 02:30Cell Lysis, Crosslinking and Sample Preparation
  • 05:22Immunoprecipitation
  • 07:06Sample Preparation for nano-LC-MS/MS
  • 10:50Results: HSP70B with its Nucleotide Exchange Factor CGE1
  • 14:07Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Vi præsenterer en variation af QUICK (kvantitative Immunoprecipitation Kombineret med Knockdown) tilgang, der blev indført tidligere at skelne mellem sande og falske protein-protein interaktioner. Vores tilgang er baseret på<sup> 15N</sup> Metabolisk mærkning, moduleringen af ​​affiniteter af protein-protein-interaktioner ved tilstedeværelsen / fraværet af ATP, immunpræcipitation, og kvantitativ massespektrometri.

Tags

Protein-protein Interactions15N Metabolic LabelingImmunoprecipitationQuantitative Mass SpectrometryAffinity ModulationCo-immunoprecipitationTargeted ApproachMass Spectrometry (LC-MS/MS)False Positive DiscoveriesRNAiQUICK (QUantitative Immunoprecipitation Combined With Knockdown)

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

check_url/fr/4083?article_type=v

MALDI Sample Preparation: the Ultra Thin Layer Method
check_url/fr/4083?article_type=v

A Quantitative Assessment of The Yeast Lipidome using Electrospray Ionization Mass Spectrometry
check_url/fr/4083?article_type=v

In-vivo Detection of Protein-protein Interactions on Micro-patterned Surfaces
check_url/fr/4083?article_type=v

Identifikation af protein-komplekser i<em> Escherichia coli</em> Hjælp Sekventiel Peptide Affinitetsrensning i kombination med Tandem massespektrometri
check_url/fr/4083?article_type=v

En ny tilgang til en sammenlignende analyse af multiprotein komplekser Baseret på<sup> 15</sup> N metabolisk mærkning og kvantitativ massespektrometri
check_url/fr/4083?article_type=v

Undersøgelse af protein-protein interaktioner i levende celler Brug Bioluminescens Resonance Energy Transfer
check_url/fr/4083?article_type=v

Chromatin Immunpræcipitation Assay til identifikation af Arabidopsis Protein-DNA interaktioner<em> In vivo</em
check_url/fr/4083?article_type=v

Identifikation af MyoD Interactome Brug Tandem Affinity Rensning Koblet til massespektrometri
check_url/fr/4083?article_type=v

Undersøgelse af Protein-protein interaktioner i Autophagy forskning
check_url/fr/4083?article_type=v

Kvantificering af lokationsspecifikke Protein lysin Acetylation og Succinylation støkiometrisk ved hjælp af Data-uafhængig erhvervelse massespektrometri

Read Article