Journal
/
Biologie
/
Ett protokoll för identifiering av protein-proteininteraktioner Baserat på<sup> 15</sup> N metabolisk märkning, immunoutfällning, kvantitativa masspektrometri och Affinity modulering
Journal JoVE
Biologie
This content is Free Access.
Journal JoVE Biologie
A Protocol for the Identification of Protein-protein Interactions Based on 15N Metabolic Labeling, Immunoprecipitation, Quantitative Mass Spectrometry and Affinity Modulation
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Ett protokoll för identifiering av protein-proteininteraktioner Baserat på<sup> 15</sup> N metabolisk märkning, immunoutfällning, kvantitativa masspektrometri och Affinity modulering

DOI:
10.3791/4083-v

•

14:44 min

•

September 24, 2012

•

, , , , ,
1Max Planck Institute of Molecular Plant Physiology, 2University of Kaiserslautern

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 02:30Cell Lysis, Crosslinking and Sample Preparation
  • 05:22Immunoprecipitation
  • 07:06Sample Preparation for nano-LC-MS/MS
  • 10:50Results: HSP70B with its Nucleotide Exchange Factor CGE1
  • 14:07Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Vi presenterar en variation av QUICK (Quantitative Immunoprecipitation kombination med Knockdown) strategi som infördes tidigare att skilja mellan sanna och falska protein-protein interaktioner. Vår strategi bygger på<sup> 15N</sup> Metabolisk märkning, modulering av affiniteter av protein-protein-interaktioner genom närvaron / frånvaron av ATP, immunprecipitation och kvantitativ masspektrometri.

Tags

Protein-protein Interactions15N Metabolic LabelingImmunoprecipitationQuantitative Mass SpectrometryAffinity ModulationCo-immunoprecipitationTargeted ApproachMass Spectrometry (LC-MS/MS)False Positive DiscoveriesRNAiQUICK (QUantitative Immunoprecipitation Combined With Knockdown)

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

check_url/fr/4083?article_type=v

MALDI Provberedning: Ultra tunt lager Metod
check_url/fr/4083?article_type=v

En kvantitativ bedömning av jästen Lipidome med elektrospray Spektrometri jonisation
check_url/fr/4083?article_type=v

In vivo Detektion av protein-protein interaktioner på mikro-mönstrade ytor
check_url/fr/4083?article_type=v

Identifiering av proteinkomplex i<em> Escherichia coli</em> Hjälp Sekventiell rening peptid affinitet i kombination med tandem masspektrometri
check_url/fr/4083?article_type=v

En ny metod för jämförande analys av multiproteinkomplex baserat på<sup> 15</sup> N Metabolic Märkning och kvantitativ masspektrometri
check_url/fr/4083?article_type=v

Undersökning av protein-proteininteraktioner i levande celler med hjälp Bioluminescence Resonance Energy Transfer
check_url/fr/4083?article_type=v

Kromatin Immunoprecipitation analys för identifiering av Arabidopsis Protein-DNA-interaktioner<em> In Vivo</em
check_url/fr/4083?article_type=v

Identifiering av MyoD Interactome Använda Tandem Affinity Purification Kopplad till masspektrometri
check_url/fr/4083?article_type=v

Studie av Protein-protein interaktioner i autofagi forskning
check_url/fr/4083?article_type=v

Kvantifiering av platsspecifika Protein lysin acetylering och Succinylation stökiometri använder Data-oberoende förvärv masspektrometri

Read Article