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Monitorização das células-autônomas Ritmos relógio circadiano de expressão genética dos Repórteres Bioluminescência luciferase
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE Biologie
Monitoring Cell-autonomous Circadian Clock Rhythms of Gene Expression Using Luciferase Bioluminescence Reporters
DOI:

10:38 min

September 27, 2012

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Chapitres

  • 00:05Titre
  • 02:01Construction of Lentiviral Luciferase Reporters
  • 02:28Production of Lentiviral Particles: Seed Cells (Day 1)
  • 03:05Transient Transfection: CaPO4/DNA Precipitation (Day 2)
  • 04:23Harvest Viral Particles (Days 3-4)
  • 05:02Infection of 3T3 Cells (Day 3 Onward)
  • 06:12Synchronization and Change to Recording Medium
  • 07:02Bioluminescence Recording of Reporter Cells
  • 07:26Data Analysis and Presentation
  • 08:12Results: Phase-specific Circadian Reporters
  • 09:47Conclusion

Summary

Traduction automatique

Relógios circadianos funcionam no interior das células individuais, ou seja, são células-autónomo. Aqui, descrevem métodos para a geração de modelos de células autónomas relógio usando não-invasiva, com base em tecnologia de luciferase bioluminescência em tempo real. Células repórter fornecer tratáveis, sistemas modelo funcional para estudar biologia circadiano.

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