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Studiare proteolisi della ciclina B a livello di singola cellula in popolazioni di cellule intere
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE Biologie
Studying Proteolysis of Cyclin B at the Single Cell Level in Whole Cell Populations
DOI:

10:54 min

September 17, 2012

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Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:13Seeding of U2OS-based Cyclin B-SNAP Reporter Cells
  • 03:38Staining of Reporter Cells with SNAP Substrate
  • 05:34Measurement of Fluorescence Intensity
  • 07:07Analysis of Proteolytic Profiles using Scan^R
  • 09:15Results: Cyclin B Kinetics during Mitosis
  • 10:31Conclusion

Summary

Traduction automatique

Metafase di anafase transizione viene attivato attraverso la promozione anafase-complesso (APC / C)-dipendente ubiquitinazione e la successiva distruzione della ciclina B. Qui, abbiamo creato un sistema che, a seguito di pulse-chase etichettatura, permette di monitorare ciclina proteolisi B in popolazioni di cellule intere e facilita la rilevazione di interferenza del checkpoint mitotico.

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