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检测蛋白质棕榈酰化培养海马神经元通过免疫沉淀和酰基-生物素交易所（ABE）

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Neurosciences

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Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange (ABE)

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检测蛋白质棕榈酰化培养海马神经元通过免疫沉淀和酰基-生物素交易所（ABE）

DOI:

10.3791/50031-v

•

16:33 min

•

February 18, 2013

•

G. Stefano Brigidi, Shernaz X Bamji

¹Department of Cellular and Physiological Sciences, Brain Research Centre,University of British Columbia

Chapitres

00:05Titre
02:08Extraction of Target Protein from Cultured Primary Hippocampal Neurons
05:54Acyl-Biotin Exchange: Hydroxylamine (HAM) Cleavage
09:17Elution of Biotin-conjugated Target Protein and SDS-PAGE
10:46Western Blotting and Detection of Palmitoylation of Target Protein
12:16Results: Detecting Palmitoylation of a Neuronal Protein
16:07Conclusion

Summary

Traduction automatique

棕榈酸与蛋白质的可逆加成是一个重要的调节细胞内蛋白质的活动。许多突触蛋白被棕榈酰化的神经元中，这是一个特别令人感兴趣。我们利用一个简单的检测棕榈酰化蛋白在培养的神经元，这可适于多种细胞类型和组织的生化方法。

Tags

Protein Palmitoylation Acyl-biotin Exchange (ABE) Assay Immunoprecipitation Hippocampal Neurons Protein Trafficking Post-translational Modification Lipid Modification Cysteine Hydroxylamine Biotin Western Blotting

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