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Détection de la palmitoylation des protéines dans les neurones de l'hippocampe en culture par immunoprécipitation et Acyl-biotine Exchange (ABE)
Journal JoVE
Neurosciences
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Journal JoVE Neurosciences
Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange (ABE)
DOI:

16:33 min

February 18, 2013

,

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 02:08Extraction of Target Protein from Cultured Primary Hippocampal Neurons
  • 05:54Acyl-Biotin Exchange: Hydroxylamine (HAM) Cleavage
  • 09:17Elution of Biotin-conjugated Target Protein and SDS-PAGE
  • 10:46Western Blotting and Detection of Palmitoylation of Target Protein
  • 12:16Results: Detecting Palmitoylation of a Neuronal Protein
  • 16:07Conclusion

Summary

Traduction automatique

L'addition réversible aux protéines de palmitate est un régulateur important du trafic intracellulaire des protéines. Ceci est d'un intérêt particulier dans les neurones où de nombreuses protéines synaptiques sont palmitoylées. Nous utilisons une méthode simple biochimique pour détecter les protéines dans les neurones en culture palmitoylées, qui peuvent être adaptés à plusieurs types de cellules et de tissus.

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