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Préparation de la recombinaison de protéines Mgm101 par la stratégie de marquage MBP basée
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Biologie
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Journal JoVE Biologie
Preparation of the Mgm101 Recombination Protein by MBP-based Tagging Strategy
DOI:

11:40 min

June 25, 2013

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Chapitres

  • 00:05Titre
  • 02:10Construction of MBP-Mgm101 Fusion Protein
  • 03:16Expression, Induction, Cell Lysis and DNase I Treatment
  • 05:28Purification on Amylose Column
  • 07:07PreScission Protease Cleavage and Cation Exchange Chromatography
  • 08:42Size Exclusion Chromatography
  • 10:27Analysis of Purified Mgm101
  • 11:23Conclusion

Summary

Traduction automatique

La protéine de nucléoïde mitochondrial de la levure, Mgm101, est une protéine de recombinaison Rad52 type qui forme des gros anneaux oligomères. Un protocole est décrit pour préparer Mgm101 recombinant soluble avec la protéine de liaison du maltose (MBP)-tagging stratégie couplée avec échange de cations et la chromatographie d'exclusion stérique.

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