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Preparación de la proteína de recombinación Mgm101 por Estrategia de etiquetas MBP basado
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Biologie
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Journal JoVE Biologie
Preparation of the Mgm101 Recombination Protein by MBP-based Tagging Strategy
DOI:

11:40 min

June 25, 2013

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Chapitres

  • 00:05Titre
  • 02:10Construction of MBP-Mgm101 Fusion Protein
  • 03:16Expression, Induction, Cell Lysis and DNase I Treatment
  • 05:28Purification on Amylose Column
  • 07:07PreScission Protease Cleavage and Cation Exchange Chromatography
  • 08:42Size Exclusion Chromatography
  • 10:27Analysis of Purified Mgm101
  • 11:23Conclusion

Summary

Traduction automatique

La proteína nucleoide mitocondrial de levadura, Mgm101, es una proteína de recombinación de tipo Rad52 que forma grandes anillos de oligómeros. Un protocolo se describe la preparación Mgm101 recombinante soluble usando la proteína de unión a maltosa (MBP)-etiquetado estrategia junto con intercambio catiónico y cromatografía de exclusión por tamaño.

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