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Un quantitativo test per studiare proteine: DNA interazioni, Discover trascrizionali regolatori dell'espressione genica, e identificare nuovi agenti anti-tumorali
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Journal JoVE Biologie
A Quantitative Assay to Study Protein:DNA Interactions, Discover Transcriptional Regulators of Gene Expression, and Identify Novel Anti-tumor Agents
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Un quantitativo test per studiare proteine: DNA interazioni, Discover trascrizionali regolatori dell'espressione genica, e identificare nuovi agenti anti-tumorali

DOI:
10.3791/50512-v

•

06:43 min

•

August 31, 2013

•

, , , , ,
1Greenebaum Cancer Center,University of Maryland School of Medicine, 2Program in Molecular Medicine,University of Maryland School of Medicine, 3Department of Biochemistry & Molecular Biology,University of Maryland School of Medicine, 4Department of Pharmacology & Experimental Therapeutics,University of Maryland School of Medicine, 5Department of Pathology and Biochemistry & Molecular Biology,University of Maryland School of Medicine

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:49Cell Culture and Nuclear Protein Isolation
  • 02:46Preparation of 96-well Plates by Incubation with Nuclear Extracts
  • 03:58Measurement of RUNX2 DNA Binding
  • 05:36Results: Inhibition of RUNX2 DNA Binding
  • 06:22Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Abbiamo sviluppato un DNA-binding, dosaggio quantitativo basato su ELISA per misurare le interazioni tra fattori di trascrizione con il DNA. Alta specificità per la proteina RUNX2 è stato raggiunto con un consenso DNA riconoscimento oligonucleotide e anticorpo monoclonale specifico. Rilevamento colorimetrico con una reazione substrato anticorpo enzimatico accoppiato stata monitorata in tempo reale.

Tags

Protein:DNA InteractionsTranscriptional RegulatorsGene ExpressionAnti-tumor AgentsDNA-binding AssayEMSAChIPD-ELISARUNX2Protein-DNA InteractionQuantitative AssayDrug Screening

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