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蛋白质纯化方法测定结合亲和力微尺度热泳
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Biologie
Protein Purification-free Method of Binding Affinity Determination by Microscale Thermophoresis
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蛋白质纯化方法测定结合亲和力微尺度热泳
DOI:
10.3791/50541-v
•
10:22 min
•
August 15, 2013
•
Lyuba Khavrutskii
2
,
Joanna Yeh
,
Olga Timofeeva
,
Sergey G. Tarasov
,
Samuel Pritt
,
Karen Stefanisko
,
Nadya Tarasova
1
Cancer and Inflammation Program
,
National Cancer Institute
,
2
Basic Science Program
,
SAIC-Frederick, Inc.
,
3
Departments of Oncology and Radiation Medicine
,
Georgetown University Medical Center
,
4
Structural Biophysics Laboratory
,
National Cancer Institute
Chapitres
00:05
Titre
01:43
Preparation of Cell Lysate
03:20
Determination of Optimal Lysate Dilution
04:02
Microscale Thermophoresis Binding Studies
07:05
Microscale Thermophoresis Data Analysis
08:25
Results: Measuring the Affinity of Non-phosphorylated STAT3 Protein Binding to Oligonucleotides
09:40
Conclusion
Summary
Traduction automatique
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Türkçe (Turkish)
Traduction automatique
可广泛用于微型热泳(MST)无需纯化从细胞裂解液中的目标蛋白的结合亲和力的测定。该协议涉及过表达GFP融合蛋白,在非变性条件下的细胞裂解,MST信号检测在不同浓度的配体的存在下。
Tags
Protein Purification
Microscale Thermophoresis
Binding Affinity
KD Determination
GFP-fused Protein
STAT3
Cell Lysate
Non-denaturing Conditions
Drug Discovery
Protein Interactions
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