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Drug-induzierte Sensibilisierung der Adenylatzyklase: Assay Straffung und Miniaturisierung für Small Molecule-und siRNA-Screening-Anwendungen
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Chapitres
- 00:05Titre
- 01:37Expansion and Cryopreservation of Assay Ready Cells
- 02:58Plating Assay Ready Cells
- 04:15Small Molecule Screening and Persistent Agonist Treatment
- 05:16Stimulation, Quenching, and Estimation of cAMP Accumulation
- 07:02Results: Development and Testing of a Cell-based 384 Well Sensitization Assay with Receptor Antagonists
- 09:12Conclusion
Persistent Aktivierung inhibierenden G-Protein-gekoppelten Rezeptoren führt Sensibilisierung von Adenylylcyclase-Signalisierung. Um die wesentlichen molekularen Signalwege zu identifizieren, sind nonbiased Ansätze notwendig, aber diese Strategie erfordert die Entwicklung einer skalierbaren zellbasierten Assay-cAMP-Sensibilisierung. Hier beschreiben wir eine Sensibilisierung Assay für Kleinmolekül-und siRNA-Screening.
