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Inducido por fármacos Sensibilización de adenilciclasa: Racionalización Ensayo y miniaturización de moléculas pequeñas y siRNA aplicaciones de cribado
Journal JoVE
Bio-ingénierie
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Journal JoVE Bio-ingénierie
Drug-induced Sensitization of Adenylyl Cyclase: Assay Streamlining and Miniaturization for Small Molecule and siRNA Screening Applications
DOI:

09:39 min

January 27, 2014

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Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:37Expansion and Cryopreservation of Assay Ready Cells
  • 02:58Plating Assay Ready Cells
  • 04:15Small Molecule Screening and Persistent Agonist Treatment
  • 05:16Stimulation, Quenching, and Estimation of cAMP Accumulation
  • 07:02Results: Development and Testing of a Cell-based 384 Well Sensitization Assay with Receptor Antagonists
  • 09:12Conclusion

Summary

Traduction automatique

La activación persistente de inhibidores G acoplados a proteínas receptores da como resultado la sensibilización de la señalización de la adenilato ciclasa. Para identificar las vías moleculares esenciales, los enfoques no sesgada son necesarios, sin embargo, esta estrategia requiere el desarrollo de un ensayo de sensibilización cAMP basada en células escalable. Aquí se describe un ensayo para la sensibilización y la detección de moléculas pequeñas siRNA.

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