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Generación y purificación de Humanos INO80 remodelación de la cromatina complejos y Subcomplejos
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Generation and Purification of Human INO80 Chromatin Remodeling Complexes and Subcomplexes
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Generación y purificación de Humanos INO80 remodelación de la cromatina complejos y Subcomplejos

DOI:
10.3791/51720-v

•

08:44 min

•

October 23, 2014

•

, , ,
1Stowers Institute for Medical Research, 2Department of Biochemistry & Molecular Biology,Kansas University Medical Center

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:23Isolation of Nuclei
  • 02:45Extracting Nuclei with Salt
  • 04:38Immunoaffinity Purification of the Human INO80 or INO80 Subcomplexes
  • 06:53Results: Analysis of the Composition of Immunopurified INO80 Complexes and Subcomplexes
  • 08:01Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Este protocolo describe un procedimiento para la generación y purificación de tipo salvaje y versiones mutantes del complejo de remodelación de la cromatina INO80 humano. Etiquetadas con epítopo versiones de subunidades INO80 se expresaron de manera estable en células HEK293, y los complejos completos y complejos que carecen de conjuntos específicos de subunidades se purifican mediante cromatografía de inmunoafinidad.

Tags

INO80 Chromatin Remodeling ComplexNucleosome DynamicsDNA AccessibilityATP-dependent Nucleosome RemodelingIno80 ATPaseFLAG-tagged Ino80HEK 293 CellsSiRNA DepletionFLAG ImmunoprecipitationSubcomplexesMass SpectrometryChromatin Remodeling Assays

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