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De alta resolução espacial e temporal Análise de Receptor Dynamics por uma única molécula de microscopia de fluorescência
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Journal JoVE Bio-ingénierie
High-resolution Spatiotemporal Analysis of Receptor Dynamics by Single-molecule Fluorescence Microscopy

De alta resolução espacial e temporal Análise de Receptor Dynamics por uma única molécula de microscopia de fluorescência

DOI:
10.3791/51784-v

•

15:13 min

•

July 25, 2014

•

, , ,
1Institute of Pharmacology and Toxicology and Bio-Imaging Center/Rudolf Virchow Center, DFG-Research Center for Experimental Biomedicine,University of Würzburg, Germany

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 02:00Coverslip Cleaning
  • 03:33Preparation of Calibration Samples
  • 04:41Transfection
  • 07:35Protein Labeling
  • 08:58Image Acquisition
  • 10:49Image Analysis
  • 12:35Results: TIRF Microscopy Detects and Tracks Single Receptors on the Surface of Living Cells
  • 14:31Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

This protocol describes how to use total internal reflection fluorescence microscopy to visualize and track single receptors on the surface of living cells and thereby analyze receptor lateral mobility, size of receptor complexes as well as to visualize transient receptor-receptor interactions. This protocol can be extended to other membrane proteins.

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Keywords: Single-molecule MicroscopyReceptor DynamicsTIRF MicroscopyReceptor-receptor InteractionsMembrane ProteinsG-protein-coupled Receptorsβ2-adrenergic ReceptorGABAB ReceptorSpatiotemporal AnalysisFluorescence LabelingReal-time ImagingEnsemble Measurements

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