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Luminescence Resonance Energy Transfer to Study Conformational Changes in Membrane Proteins Expressed in Mammalian Cells

Luminescência Ressonância transferência de energia para estudar mudanças conformacionais na membrana proteínas expressas em células de mamíferos

DOI:
10.3791/51895-v

•

08:31 min

•

September 16, 2014

•

, ,
1Center for Membrane Biology, Department of Biochemistry and Molecular Biology,University of Texas Health Science Center at Houston

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:29Protein Tagging Site and Fluorophore Selection
  • 03:04Luminescence Resonance Energy Transfer (LRET) Setup
  • 05:00Data Analysis
  • 06:58Results: Representative LRET Measurements
  • 07:57Conclusion

Summary

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Descrevemos aqui um método melhorado de transferência de luminescência Ressonância Energia (lRet) onde é considerado um local de clivagem da protease entre os locais fluoróforo doador e receptor. Esta modificação permite a obtenção de sinais lRet específicas decorrentes de proteínas de membrana de interesse, permitindo o estudo de proteínas de membrana, sem purificação de proteínas.

Tags

Keywords: Luminescence Resonance Energy TransferLRETMembrane ProteinsConformational ChangesLanthanideTerbiumDonor-acceptor PairProtease Cleavage SiteMammalian Cells

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