新生児マウスにおける静脈注射

この手順の全体的な目標は、新生児マウスに試験物を静脈内投与することです。これは、最初に治療する1〜2日齢のマウスを特定することによって達成されます。2番目のステップは、射出材料を準備することです。

次に、注入を行います。最後のステップは、治療を受けて覚醒したマウスを母親に戻すことです。最終的には、試験品が所望の効果を有するかどうかを判断するために、下流のアッセイが必要です。

一般的に、この方法に不慣れな個人は、適切な静脈を特定して標的にすることに最も苦労します。まず、注射手順に必要なすべての機器を集めます。さらに、PBSで1%エバンスブルー染料を準備し、注入する動物ごとに30ゲージの針が付いたインスリン注射器1本を準備します。

次に、子犬を操作しながら、ダムを別のケージに移します。準備ができたら。1匹の子犬を濡れた氷に直接30〜60秒間置きます。

麻酔をかけるため。動物が氷の上にいる間は、低体温症関連の合併症のリスクがあるため、動物を氷の上に長時間放置しないでください。30マイクロリットルのエヴァンの青い染料が入ったロータスシリンジ。

動物が完全に麻酔をかけられたら、まだ呼吸しながら氷上で動かないことが確認され、顕微鏡下で右利き用注射のために動物を動かし、動物の銃口を正しい場所に置きます。左の人差し指を銃口に置き、左の中指をイヤホンに寄り添わせて、イヤホンが人差し指と中指の間にくるようにしました。イヤフォンのすぐ前方で、皮膚を操作するときに動く表在性の毛細血管を調べます。

この毛細管はターゲットではありません。ただし、側頭静脈の同定には同定が重要です。次に、皮膚の位置に関係なく固定されたままの毛細血管よりも劣る暗い影のある静脈を見つけます。

側頭静脈は影のように見え、背側から腹側に走り、頸静脈に供給されます。針を斜めにして側頭静脈に入ります。正しく挿入されている場合。

皮膚を通して血液で満たされた針の斜角を見ることが可能です。次に、プランジャーをゆっくりと押し下げ、顔の側面に静脈が白くなっていることに注意してください。注射液の逆流を防ぐために、針を静脈内にさらに10〜15秒間留まらせます。

適切な注射の後、子犬は青くなるはずです。ほとんどすぐに。針を取り外し、穏やかな力で綿棒を注射部位に当て、血栓ができるまで注ぎます。

子犬が回復して再び温まるまで2〜3分待ちます。子犬が意識があり、直立し、動いていることを確認します。ケージに戻る前に、子犬を手袋をはめた手で子犬を包み込み、回復を助けるための適切な暖かさを提供することができます。

または、注入した子犬を温めるのを容易にするために、ホームケージの下に加熱パッドを置きます。子犬を家のケージに戻し、寝具で覆います。母犬によるリアックの受け入れを確実にするために、各子犬に新しい注射器と綿棒を使用して、新生児のA V 9 Inod GFP導入遺伝子発現の静脈内注射後の無菌性を維持します。

GFPの発現は脊髄でも検出され、脊髄運動ニューロンと後根神経節ニューロンの両方で見られます。GFP免疫蛍光は、自己補完型A A V 9 GFPの新生児静脈内注射後の成体マウス、心臓、肝臓で検出できます。.それに比べて、一度習得した注射マウスの心臓と肝臓にはGFP発現は存在しません。

このテクニックは、動物ごとに3〜5分かかります。このビデオを見た後、新生児マウスへの静脈内注射を行う方法についてよく理解しているはずです。