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El uso de nucleótidos Stopped-Flow Fluorescencia y etiquetadas para Analizar el Ciclo de Facturación ATP de Kinesins
Journal JoVE
Chimie
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Journal JoVE Chimie
Use of Stopped-Flow Fluorescence and Labeled Nucleotides to Analyze the ATP Turnover Cycle of Kinesins
DOI:

07:25 min

October 17, 2014

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Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:13Measurement of Association and Dissociation Rate Constants for mantATP
  • 04:18Measurement of the Dissociation Rate Constant for mantADP
  • 05:19Results: Analysis of the ATP Turnover Cycle of Kinesins
  • 06:45Conclusion

Summary

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Kinesins se caracterizan por la interacción dependiente de nucleótidos con los microtúbulos: un ciclo de recambio de ATP acoplada a un ciclo de la interacción de los microtúbulos. A continuación, describimos los protocolos para analizar la cinética de las transiciones de nucleótidos individuales en el ciclo de recambio de ATP de un kinesina utilizando nucleótidos marcados con fluorescencia y fluorescencia de flujo detenido.

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