Синтетическая методология для асимметричных Ферроцен, полученных Bio-сопряженных систем через Solid методологии фазы смолу на основе

Общая цель данного эксперимента заключается в получении асимметричных папоротников, биотина, биоконъюгатов, которые могут быть иммобилизованы на поверхности золота. Это достигается синтезом биоконъюгата биотина ферна на твердофазной смоле. На втором этапе биоконъюгат удаляется из смолы, что позволяет выделить и охарактеризовать соединение.

Затем биоконъюгат инкубируют с золотой поверхностью, чтобы обеспечить сцепление талатов с золотом. Результаты показывают, что биоконъюгат папоротника может быть получен с хорошим выходом и чистотой, а затем иммобилизован на золотой поверхности. Основное преимущество использования этого метода по сравнению с существующими методами, такими как методы, основанные на растворе, заключается в том, что очистка проста и понятна.

В дополнение к отказу от побочных продуктов, производимых с помощью методов, основанных на растворах, у нас впервые возникла идея этого метода, когда мы задумались об эффективности и практичности датчиков глюкозы, которые используются для наблюдения за пациентами с диабетом. Демонстрировать эту процедуру будут Шон Родич из моей лаборатории и Паулина Гонсалес, студенты и аспиранты соответственно из моей лаборатории. Во-первых, 250 миллиграммов биотина загрузили смолу в фриттированный шприц.

Набухните смолу, набрав пять миллилитров диметилформамида и встряхивая шприц на лабораторном шейкере в течение 20 минут. Когда закончите, изгоните раствор и повторите набухание диметилформамида. После этого удалите защитную группу FOC, добавив в шприц от четырех до шести миллилитров 20% папина в диметилформамиде с последующим встряхиванием в течение 10-15 минут. Повторив процесс глубокой защиты, промойте смолу три раза последовательностью диметилформамида, диметилформамида и метанола один к одному, метанола один к одному и дихлорметана и дихлорметана.

После вытеснения раствора проведите гиновый тест на небольшой выборке шариков, чтобы подтвердить успешную глубокую защиту по присутствию синего цвета при нагревании. Затем смешайте раствор, содержащий один первичный FM-аминофарин, одну карбоновую кислоту, гидрат HOBT, DIC di, изопропилэтиламин и смесь дихлорметана и диметилформамида четыре к одному. Наберите этот раствор в шприц с фриткой и осторожно встряхните на лабораторном шейкере в течение шести часов.

После промывки смолы проведите тест Хайрана, как описано ранее, чтобы подтвердить, что сцепление произошло. После этого удалите группу FM o путем добавления 20%ина в диметилформамиде к смоле в шприце после встряхивания промойте так же, как и раньше. Приготовьте раствор, состоящий из fmm cyst trit до O-H-O-B-T гидрата, DIC di, изопропилэт ламина, и смеси дихлорметана и диметилформамида четыре к одному.

Добавьте этот коктейль из цистинового соединения в отлаженный шприц и осторожно встряхивайте в течение шести часов. После подтверждения муфты с помощью теста HYN удалите компонент F MOC с 20%ine. После завершения мойки проверьте свободный амин на клемме с помощью теста гидранта.

На этом этапе сделайте раствор трихлоруксусной кислоты в воде раз, два и этана ол и попробуйте изопропил. Затем добавьте раствор в шприц. После встряхивания в течение четырех часов соберите полученный красно-коричневый раствор в пробирку эйнора и медленно испарите трихлоруксусную кислоту с помощью потока воздуха.

Вслед за этим примерно на 15 миллилитров холодный датиловый эфир в трубку эйнора выпадает в осадок продукт, который будет образовываться при легком взбивании. Изолируйте продукт с помощью центрифугирования. Затем повторяют циклы dэтилового эфира, промывки и центрифугирование.

Для получения биотина папоротника биоконъюгат в виде сухого вещества красного коричневого цвета. Подтвердите идентичность биоконъюгата биотина папоротника с помощью протонной и углеродной ЯМР-спектроскопии и E-S-I-M-S анализа. Проведите ВЭЖХ и элементный анализ, чтобы подтвердить состав выделенного соединения.

После того, как продукт будет полностью охарактеризован, разрежьте золотые ломтики с полимерной оболочкой на квадраты размером примерно 0,25 квадратных дюйма. Затем наполните стакан объемом 50 миллилитров одним миллимолярным деионизированным водным раствором биоконъюгата папоротина. Добавьте одну из золотых горлочек в стакан и накройте стеклом для часов.

Дайте предметному стеклу поинкубироваться в течение ночи при комнатной температуре без перемешивания. После инкубации извлеките золотую горку из раствора и промойте деионизированной водой. После того, как предметное стекло высохнет, получите изображения сканирующей электронной микроскопии с помощью сканирующего электронного микроскопа, чтобы наблюдать за иммобилизованным биоконъюгатом биотина папоротина.

Здесь показана связанная смолой форма биоконъюгата биотина папоротина. Ковалентное присоединение компонента папоротника приводит к оранжевому оттенку гранул смолы, что указывает на иммобилизованный комплекс, содержащий железо, в отличие от поглощения железа компонентом ПЭГ гранул смолы. После удаления соединения из гранул смолы результирующая чистота и выход намного превосходят типичную методологию решения.

После освоения этого знака его можно выполнить за три дня, если он выполнен правильно. Не забывайте, что работа с хлоркислотной кислотой и F и диета могут быть крайне опасными мерами предосторожности, так как использование средств индивидуальной защиты и проведение процедуры внутри вытяжного шкафа всегда должны приниматься при выполнении этой процедуры.