Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Chapitres
- 00:05Titre
- 00:58Yeast Cell Culture and Radiolabeling of Phosphoinositides
- 02:58Deacylation and Extraction of the Radiolabeled Phosphoinositides
- 05:14Separation of Tritium-labeled Glycero-inositides by High Pressure Liquid Chromatography (HPLC)
- 07:15Data Analysis
- 08:55Results: HPLC Analysis of Radiolabeled Phosphoinositides
- 09:55Conclusion
Phosphoinositides signaleren lipiden waarvan de relatieve abundantie snel verandert in reactie op verschillende stimuli. Dit artikel beschrijft een methode om de overvloed aan phosphoinositides meten door metabolisch labelen van cellen met 3H-myo-inositol, gevolgd door extractie en deacylering. Geëxtraheerd glycero-inositiden omgezet worden vervolgens gescheiden door hoge-prestatie vloeistofchromatografie en gekwantificeerd door flow scintillatieteller.
