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توليد كريسبر / Cas9 ساطة Monoallelic الحذف لدراسة وظيفة محسن في الخلايا الجذعية الجنينية الماوس
Journal JoVE
Biologie du développement
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Journal JoVE Biologie du développement
Generating CRISPR/Cas9 Mediated Monoallelic Deletions to Study Enhancer Function in Mouse Embryonic Stem Cells
DOI:

11:31 min

April 02, 2016

,

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 00:56Transfection
  • 02:40Culturing Clones
  • 04:23Allele-specific Primer Design
  • 08:27Genotyping the Deletion and Analyzing qPCR Results
  • 09:42Analysis of CRISPR/Cas9 Mediated Deletion in F1 ES Cells
  • 11:05Conclusion

Summary

Traduction automatique

Experimental validation of enhancer activity is best approached by loss-of-function analysis. Presented here is an efficient protocol that uses CRISPR/Cas9 mediated deletion to study allele-specific regulation of gene transcription in F1 ES cells which contain a hybrid genome (Mus musculus129 x Mus castaneus).

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