/

/

Detectie van RNA-bindende eiwitten door<em> In Vitro</em> RNA Pull-down in Adipocyte Cultuur

Journal JoVE
Biologie

Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.

Journal JoVE Biologie

Detection of RNA-binding Proteins by In Vitro RNA Pull-down in Adipocyte Culture

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Detectie van RNA-bindende eiwitten door<em> In Vitro</em> RNA Pull-down in Adipocyte Cultuur

DOI:

10.3791/54207-v

•

10:34 min

•

July 22, 2016

•

Qianfan Bai*¹, Zhiqiang Bai*¹, Shaohai Xu, Lei Sun²

¹Cardiovascular and Metabolic Disorders Program,Duke-NUS Medical School, ²Institute of Molecular and Cell Biology, Singapore, ³Division of Bioengineering, School of Chemical & Biomedical Engineering,Nanyang Technological University

Chapitres

00:05Titre
00:35Preparation of Biotin-labeled RNA
02:18Preparation of RNA-conjugated Beads
04:16Preparation of Cellular Lysate from Primary Adipocytes
07:00Binding and Elution of RBP
08:45Results: RNA Pull-down Assay
10:05Conclusion

Summary

Traduction automatique

Een RNA-pull-down protocol is hier geoptimaliseerd voor detectie van interacties tussen RNA-bindende eiwitten (RBPs) en niet-coderende en coderende RNAs. Een RNA fragment uit androgeenreceptor (AR) werd gebruikt als een voorbeeld om te demonstreren hoe de RBP halen uit lystate primaire bruine adipocyten.

Tags

RNA-binding Proteins RNA Pull-down Adipocyte Culture Antigen Receptor 3-Prime Untranslated Region (AR 3-Prime UTR)Biotinylated RNA In Vitro Transcription Streptavidin-coated Magnetic Beads RNA Structure Buffer RNA-protein Interactions RNA Regulatory Mechanisms Long Non-coding RNA

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

PAR-Clip - een methode om Transcriptome-breed de bindingsplaatsen van RNA-bindende eiwitten te identificeren

Genereren van RNA / DNA-Hybriden in Genomic DNA door omzetting door middel RNA-bevattende Oligonucleotiden

Pull-down van calmoduline-bindende eiwitten

In vitro transcriptie en aftopping van Gaussia Luciferase mRNA Gevolgd door HeLa celtransfectie

Chromatine Isolatie door RNA-zuivering (Chirp)

Detectie van virale RNA door fluorescentie<em> In situ</em> Hybridisatie (FISH)

Isolatie van Ribosoom Bound Nascent Polypeptiden<em> In vitro</em> Om Translationeel Pauze plaatsen langs mRNA identificeren

Rapid Generation of Amyloid from Native Proteins In vitro

Verbeterde Northern Blot detectie van kleine RNA Species in<em> Drosophila melanogaster</em

Isolatie en cultuur van menselijke volwassen adipocyten met behulp van membraan volwassen adipocyte aggregaat culturen (MAAC)

Read Article