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Analyse des SCAP<em> N</em> -glycosylation Et la traite des cellules humaines
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Analysis of SCAP N-glycosylation and Trafficking in Human Cells
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Analyse des SCAP<em> N</em> -glycosylation Et la traite des cellules humaines

DOI:
10.3791/54709-v

•

11:27 min

•

November 08, 2016

•

, , , , , ,
1Department of Radiation Oncology,The Ohio State University Comprehensive Cancer Center and College of Medicine

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:05Detection of Endogenous SCAP Protein in Human Cells
  • 04:11Analysis of SCAP N-glycosylation in Human Cells
  • 07:15Detection of SCAP Trafficking from ER to Golgi Using GFP-SCAP in Human Cells
  • 09:07Results: SCAP Trafficking from ER to Golgi
  • 10:43Conclusion

Summary

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Nous décrivons un procédé modifié pour l' isolement de la fraction membranaire à partir de cellules humaines et la préparation des échantillons pour la détection de SCAP N -glycosylation et la protéine totale en utilisant Western Blot. Nous présentons en outre un procédé GFP-étiquetage pour surveiller le trafic SCAP utilisant la microscopie confocale. Ce protocole peut être utilisé dans les laboratoires de biologie réguliers.

Tags

Keywords: SCAPN-glycosylationTraffickingHuman CellsSREBPLipid MetabolismPNGaseU87 CellsCell Membrane FractionsNuclear ExtractsSDS-PAGEWestern BlotBradford Protein Assay

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