December 2nd, 2016
מתואר מודל חולדה של התכווצות אבי העורקים הבטני הגורם להיפרטרופיה של הלב ועיצוב מחדש. שיטה יעילה, ניתנת לשחזור וזעיר פולשנית משמשת כדי לספק פלטפורמה פשוטה אך שימושית למחקר בהיפרטרופיה ותפקוד לקוי של שריר הלב.
המטרה הכוללת של ההליך הכירורגי היא לספק פלטפורמה פשוטה לחקר היפרטרופיה של שריר הלב, שיפוץ ותפקוד לקוי. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הלב וכלי הדם כגון איתות הכרוך בהיפרטרופיה קרדיולוגית ושיפוץ. כמו גם גילוי מטרות טיפוליות חדשות במחלות לב יתר לחץ דם.
היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שמדובר בשיטה זעיר פולשנית הדורשת טכניקות כירורגיות פשוטות מאוד ועם זאת התוצאות ניתנות לשחזור גבוה. ההשלכות של טכניקות אלה משתרעות על הטיפול שלנו במחלות לב יתר לחץ דם. מכיוון שהתכווצות אבי העורקים הבטני גורמת לעומס יתר בלחץ ובסופו של דבר מובילה להיפרטרופיה לבבית, שיפוץ ואי ספיקת לב.
כדי להתחיל, הכינו מחט מזרק בגודל 22 על ידי שימוש באבן השחזה כדי להקהות את הקצה. לאחר מכן בעזרת צבת, קש את המחט בזווית ישרה. הכנת חומרי הניתוח הנדרשים כולל כלוב ההתאוששות וחיטוי מכשירי הניתוח.
שמרו על החולדות בסביבות 200 גרם והחזיקו אותן במחזורי אור-חושך של 12 שעות בטמפרטורה מבוקרת עם גישה חופשית למזון ומים. הנח את החולדה במצב שכיבה על משטח ניתוח עם כרית חימום כדי לשמור על טמפרטורת הגוף. לגלח לחלוטין את אזור הניתוח כדי למנוע זיהום של הפצע באמצעות מגע עם פרווה.
לאחר מכן, בעזרת בטדין או מגיב נעים אחר, שפשפו את הבטן המגולחת היטב. לאחר מכן, בעזרת אזמל, בצע חתך של שני סנטימטרים לאורך קו האמצע של הבטן. לאחר מכן, באמצעות מי מלח רגילים, הרטיבו את איברי הבטן ושמרו על לחות האיברים במהלך הניתוח.
בעזרת כדורי צמר גפן העבירו בזהירות את איברי העיכול הצידה כדי לחשוף את הווריד הנבוב התחתון ואת אזור הצפק האחורי. לאחר מכן זהה את אבי העורקים הבטני שנמצא לצד ובדרך כלל משמאל לווריד הנבוב התחתון. כעת, בעזרת מלקחיים, חודרים את הצפק כדי לחשוף את הכלים שמתחתיו.
בודד בעדינות את אבי העורקים הבטני הסמוך לעורקי הכליה והעביר תפר משי 4/0 באורך שמונה סנטימטרים מתחת לכלי בין מקורות עורקי הכליה הימניים והשמאליים. צרו קשר כפול רופף עם התפר והשאירו לולאה בקוטר שלושה מילימטרים. לאחר מכן הנח את המחט הקהה והכפופה בגודל 22 בתוך הלולאה.
הדק את הקשר סביב אבי העורקים והמחט ולאחר מכן הסר מיד את המחט כדי להשיג התכווצות בקוטר 0.7 מילימטר. עם 6/0 תפרים סוגרים את חלל הבטן. לאחר מכן השתמש בתפרים קטועים פשוטים כדי לסגור את חתכי השריר והעור.
השתמש בתמיסת יוד כדי לקרצף את אתר הניתוח כדי למנוע זיהום. כדי למנוע כאבים לאחר הניתוח, יש לטפל בבעל החיים באצטמינופן ולהתבונן מקרוב בבעל החיים עד שהוא חוזר להכרה מספקת כפי שמצוין על ידי תנועה חופשית וצריכת מזון ושומר על שכיבה על החזה. לאחר 10 שבועות לאחר הניתוח שקלו את החולדה.
לאחר הרדמת החיה ואישור עומק ההרדמה, הניחו את החולדה על מגש מתכת. כעת בצע חתך של חמישה סנטימטרים באזור בית החזה סביב קו האמצע של תהליך ה- xiphoid. בעזרת מלקחיים חדים חודרים את הסרעפת.
לאחר מכן, בעזרת מספריים, חותכים ומסירים את כלוב הצלעות לאורך קווי האמצע משני הצדדים כדי לחשוף את הלב. כרתו בזהירות את הלב לאורך גבולות הלב וכלי הדם. לאחר מכן הסר בעדינות את הלב מבלי לתפוס את הרקמה.
הרכיב את הלב על מכשיר זלוף לנגנדורף מותאם על ידי קשירת תא המטען של אבי העורקים למחט הזילוף. לאחר מכן השתמש במאגר קרבס כדי לחלחל את הלב ולשטוף את הדם. שקלו את הלב וחשבו את היחס בין משקל הלב למשקל הגוף.
לאחר מכן, תוך כדי חבישת מסכה, הניחו את האיבר ב-4% פרפורמלדהיד וקבעו אותו על קרח למשך הלילה. לאחר קיבוע רקמת הלב הניחו אותה על מכשיר חיתוך רקמות, חתכו אותה לפרוסות בעובי שני מילימטר והניחו את החלקים בקלטת הטמעה. לאחר הטמעת פרפין וחתך נוסף על פי פרוטוקול הטקסט, הפחיתו את השקופיות על ידי הנחתן במיכל עם קסילן למשך 30 דקות.
לאחר מכן יש להחזיר לחות לרקמה בסדרת אלכוהול מדוללת ברצף ואחריה מים מזוקקים. לאחר מכן, השתמש בתמיסה אדומה מספקת של פיקרוזיריוס כדי לכסות לחלוטין את חלקי הרקמה ולדגור למשך שעה. לאחר מכן השתמש בתמיסת חומצה אצטית של 0.5% כדי לשטוף את השקופיות פעמיים.
ושוטפים את הדגימות פעמיים באלכוהול מוחלט. יבש את הדגימות באוויר והרכיב אותן בשרף סינטטי עם פתק כיסוי. לאחר מכן השתמש באור נראה מתחת למיקרוסקופ בהגדלה של פי 200 כדי לצלם את השקופיות.
לבסוף, חשב את אחוז האזור החיובי האדום של פיקרוזיריוס על פני השטח הכולל המציין את היקף הפיברוזיס. כפי שמוצג כאן, נפח הלב גדל לאחר ניתוח התכווצות אבי העורקים הבטני. כפי שמודגם על ידי יחס גבוה יותר בין משקל הלב למשקל הגוף, המהווה אינדיקטור להיפרטרופיה של הלב.
על ידי שימוש בצביעה אדומה של פיקרוזיריוס, ניתן להבחין בשריר הלב הפיברוטי עם תכולת קולגן מוגברת מאזורים רגילים. כפי שהודגם בדגימות מוכתמות אלה, פיברוזיס לב הוגבר לאחר ניתוח התכווצות אבי העורקים הבטני בהשוואה לביקורת. לאחר השליטה ניתן לבצע את הניתוח תוך 30 דקות אם הוא מבוצע כראוי.
לאחר הליך זה, ניתן לבצע שיטות אחרות כמו אקו לב על מנת לענות על שאלות נוספות על תפקוד הלב. לאחר פיתוחה טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום מחלות לב יתר לחץ דם לחקור את המנגנונים המעורבים בהיפרטרופיה קרדיו, שיפוץ וכישלון. לאחר צפייה בסרטון זה אתה אמור להבין היטב כיצד לבצע התכווצות אבי העורקים הבטני כדי לגרום לקרדיוהיפרטרופיה ושיפוץ שריר הלב בחולדות.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
מאמר זה מתאר מודל של עכברוש של התכווצות אבי העורקים הבטנית הגורמת להיפרטרופיה לבבית ושינויים מבניים. השיטה היא פולשנית מינימלית, שיחזורית מאוד ומספקת פלטפורמה שימושית למחקר בתחום היפרטרופיה ותפקוד לקוי של שריר הלב.