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Identificazione affidabile di vita neuroni dopaminergici in Culture Midbrain Utilizzando RNA Sequencing e TH-promotore-driven eGFP Expression
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Chapitres
- 00:05Titre
- 00:59Isolation of Embryonic Midbrain
- 02:55Dissociation and Plating of Cells
- 05:34Harvesting Cultured Dopaminergic Neurons for RNA Sequencing
- 07:04Generation, Purification and Amplification of First-strand cDNA
- 09:13Results: RNA-seq Detection of Expressed Transcripts in Single Dopaminergic Neurons
- 09:39Conclusion
Nella malattia di Parkinson (PD), sostanza nera (SNC) neuroni dopaminergici degenerano, portando ad una disfunzione del motore. Qui riportiamo un protocollo per la coltura di neuroni del mesencefalo ventrale da un topo che esprime eGFP guidata da una sequenza promotore la tirosina idrossilasi (TH), la raccolta neuroni fluorescenti singoli dalle culture, e misurando il loro trascrittoma utilizzando RNA-Seq.
